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vivianvj

新虫 (小有名气)

[求助] 突变质粒构建pcr问题 已有2人参与

请问,我在构建突变质粒时pcr时,为何会出现两条带呢,我用的是PGL-3basic,目的片段左边的应该是1400+,右边的应该是1600+

突变质粒构建pcr问题
引物莫条件2016-01-06 13hr 28min.jpg
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a13515517892

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议你说明具体的情况,图上最亮的是marker吗?还有就是构建质粒使用的什么方法来做的,这样我给你解释,不然不知道是怎么做的,说多了反而影响你实验
2楼2016-01-06 15:59:59
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carl_taijun

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
1楼: Originally posted by vivianvj at 2016-01-06 14:36:04
请问,我在构建突变质粒时pcr时,为何会出现两条带呢,我用的是PGL-3basic,目的片段左边的应该是1400+,右边的应该是1600+

引物莫条件2016-01-06 13hr 28min.jpg...

确定引物单一位点结合的吗?

发自小木虫IOS客户端
3楼2016-01-06 17:14:49
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vivianvj

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by a13515517892 at 2016-01-06 15:59:59
建议你说明具体的情况,图上最亮的是marker吗?还有就是构建质粒使用的什么方法来做的,这样我给你解释,不然不知道是怎么做的,说多了反而影响你实验

是这样,中间最亮的是MARKER,两边分别是两个突变质粒,左边的是1400+,右边的是1600+,这个图是PCR产物图,出现多条带,不知道后续如何处理比较好,谢谢
4楼2016-01-06 18:07:10
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vivianvj

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by carl_taijun at 2016-01-06 17:14:49
确定引物单一位点结合的吗?
...

不确定,有错配
5楼2016-01-06 18:07:26
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xufengnbu

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
vivianvj: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2016-01-08 10:12:31
直接回收你的目的条带吧

发自小木虫IOS客户端
why is the way to success
6楼2016-01-06 23:43:26
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