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南海所老龚

新虫 (正式写手)

[求助] RNA电泳为什么理论上28S亮度和宽度是18S的两倍左右 已有2人参与

各位虫友，大家好！
本人刚接触RNA实验，提取了一批RNA，电泳图见附件。查阅资料所知，理论上动物核糖体28S亮度和宽度都是18S的两倍左右，但是一直没找到合理的解释。我的理解是28S分子量是18S两倍左右，与核酸染料结合的量也大概是2倍左右，但是宽度怎么解释呢？请各位帮忙，不甚感激！

RNA电泳为什么理论上28S亮度和宽度是18S的两倍左右
RNA电泳 来自网络.png


RNA电泳为什么理论上28S亮度和宽度是18S的两倍左右-1
RNA电泳 自己的.jpg
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1楼 2015-12-30 10:27:59
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南海所老龚

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 反应链 at 2015-12-30 11:46:22
You must use a DNA ladder marker. The DNA is double strands while RNA is single one....

感谢您的回复，关于Marker的问题我明白了，单链RNA比双链DNA跑的快，所以导致比实际的Marker要小。
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TheBestandMostBeautifulThingsintheWorldCan'tBeSeenorTouched,TheyMustBeFeltwithHeart.
5楼2015-12-30 14:01:12
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南海所老龚

新虫 (正式写手)
另外补充一个问题，28S分量约4000 nt,28分子量约2000 nt（如上图图1），为什么RNA电泳后分别在2000和1000 Marker位置呢？
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TheBestandMostBeautifulThingsintheWorldCan'tBeSeenorTouched,TheyMustBeFeltwithHeart.
2楼2015-12-30 10:32:02
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反应链

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
Mammalian 28S and 18S rRNA are approximately 5 kb and 2kb in size, the theoretical 28S:18S ratio is approximately 2.7:1. But some 28S rRNAs contain an AU-rich sequence called a “hidden break” that can result in processing of these rRNA species into two smaller RNAs. It is likely that similar structural features may be responsible for the “hypersensitivity” of the mammalian 28S rRNA relative to the 18S rRNA, resulting in 28S:18S rRNA ratios that are less than the theoretical 2.7:1.
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  • 附件 1 : RNA_Quality_and_RNA_Sample_Assessment___Thermo_Fisher_Scientific.pdf
    • 2015-12-30 11:43:32, 370.44 K
3楼2015-12-30 11:43:46
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反应链

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 南海所老龚 at 2015-12-30 10:32:02
另外补充一个问题，28S分量约4000 nt,28分子量约2000 nt（如上图图1），为什么RNA电泳后分别在2000和1000 Marker位置呢？

You must use a DNA ladder marker. The DNA is double strands while RNA is single one.
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4楼2015-12-30 11:46:22
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