应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 细菌提取RNA
61/1返回列表
查看: 992  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

紫萸香慢001

新虫 (小有名气)

[求助] 细菌提取RNA 已有2人参与

用了天根和promega的试剂盒，效果都不好。有大量DNA污染，因会严重影响后续实验的进行，想请教一下大家有什么好方法可以去除DNA或者好的提取方法。谢谢啦 

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2015-12-28 15:18:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

uulovelyuu

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是加入到菌体太多导致裂解不充分？减少点样品量试试. 我也是用的天根的产品,里面有一管DNase I,基本能除干净啊.不知道你这两个牌子都用到哪款产品?
赞一下 回复此楼
2楼2015-12-28 15:26:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

科学小覃

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
DNA 污染组要是体系pH值过高，想想你加的样品有没有可能是pH升高。裂解可以补加3M的乙酸钠(pH4.5)。
赞一下 回复此楼
生物科学
3楼2015-12-28 19:45:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

紫萸香慢001

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by uulovelyuu at 2015-12-28 15:26:42
是不是加入到菌体太多导致裂解不充分？减少点样品量试试. 我也是用的天根的产品,里面有一管DNase I,基本能除干净啊.不知道你这两个牌子都用到哪款产品?

你一般加多少菌量，我最近做了一次，调了0.5麦氏，比以前少很多了，还有有DNA污染。请问你怎么验证没有DNA污染的？我是把提好的mRNA用普通DNA的试剂盒扩增相应的目的片段，结果跑胶有阳性结果，说明有DNA污染，这样对吗

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2016-01-16 23:46:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenfeng0823

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 紫萸香慢001 at 2016-01-16 23:46:40
你一般加多少菌量，我最近做了一次，调了0.5麦氏，比以前少很多了，还有有DNA污染。请问你怎么验证没有DNA污染的？我是把提好的mRNA用普通DNA的试剂盒扩增相应的目的片段，结果跑胶有阳性结果，说明有DNA污染，这样 ...

做特异基因的反转录的同时，加一个无反转录酶的对照，然后一起定量就OK了。
赞一下 回复此楼
our story begins
5楼2016-01-28 10:41:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenfeng0823

新虫 (初入文坛)
DNA消化不彻底，建议楼主换好一点的DNA酶，另可用水浴锅控温
赞一下 回复此楼
our story begins
6楼2016-01-28 10:42:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 紫萸香慢001 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 327求调剂 +5 prayer13 2026-03-23 5/250 2026-03-23 22:11 by 星空星月
[考研] 材料专硕英一数二306 +8 z1z2z3879 2026-03-18 8/400 2026-03-23 20:49 by baobaoye
[基金申请] 请教下大家 2026年国家基金申请是双盲审吗？ +3 lishucheng1 2026-03-22 4/200 2026-03-23 20:48 by god_tian
[考研] 招08考数学 +6 laoshidan 2026-03-20 14/700 2026-03-23 14:37 by 15614359529
[考研] 一志愿华中农业071010，总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 305分求调剂（食品工程） +4 Sxy112 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:26 by 无懈可击111
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +5 holy J 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:42 by Catalysis25
[考研] 280求调剂 +11 咕噜晓晓 2026-03-18 12/600 2026-03-21 22:40 by ACS Nano——
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 268求调剂 +9 简单点0 2026-03-17 9/450 2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 299求调剂 +6 △小透明* 2026-03-17 6/300 2026-03-21 02:42 by JourneyLucky
[考研] 二本跨考郑大材料306英一数二 +3 z1z2z3879 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:29 by JourneyLucky
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +12 墨墨漠 2026-03-18 13/650 2026-03-21 01:42 by JourneyLucky
[论文投稿] 申请回稿延期一个月，编辑同意了。但系统上的时间没变，给编辑又写邮件了，没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 一志愿中国海洋大学，生物学，301分，求调剂 +5 1孙悟空 2026-03-17 6/300 2026-03-19 23:46 by zcl123
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭