应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 细菌提取RNA
61/1返回列表
查看: 942  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

紫萸香慢001

新虫 (小有名气)

[求助] 细菌提取RNA 已有2人参与

用了天根和promega的试剂盒，效果都不好。有大量DNA污染，因会严重影响后续实验的进行，想请教一下大家有什么好方法可以去除DNA或者好的提取方法。谢谢啦 

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2015-12-28 15:18:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

uulovelyuu

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是加入到菌体太多导致裂解不充分？减少点样品量试试. 我也是用的天根的产品,里面有一管DNase I,基本能除干净啊.不知道你这两个牌子都用到哪款产品?
赞一下 回复此楼
2楼2015-12-28 15:26:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

科学小覃

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
DNA 污染组要是体系pH值过高，想想你加的样品有没有可能是pH升高。裂解可以补加3M的乙酸钠(pH4.5)。
赞一下 回复此楼
生物科学
3楼2015-12-28 19:45:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

紫萸香慢001

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by uulovelyuu at 2015-12-28 15:26:42
是不是加入到菌体太多导致裂解不充分？减少点样品量试试. 我也是用的天根的产品,里面有一管DNase I,基本能除干净啊.不知道你这两个牌子都用到哪款产品?

你一般加多少菌量，我最近做了一次，调了0.5麦氏，比以前少很多了，还有有DNA污染。请问你怎么验证没有DNA污染的？我是把提好的mRNA用普通DNA的试剂盒扩增相应的目的片段，结果跑胶有阳性结果，说明有DNA污染，这样对吗

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2016-01-16 23:46:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenfeng0823

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 紫萸香慢001 at 2016-01-16 23:46:40
你一般加多少菌量，我最近做了一次，调了0.5麦氏，比以前少很多了，还有有DNA污染。请问你怎么验证没有DNA污染的？我是把提好的mRNA用普通DNA的试剂盒扩增相应的目的片段，结果跑胶有阳性结果，说明有DNA污染，这样 ...

做特异基因的反转录的同时，加一个无反转录酶的对照，然后一起定量就OK了。
赞一下 回复此楼
our story begins
5楼2016-01-28 10:41:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenfeng0823

新虫 (初入文坛)
DNA消化不彻底，建议楼主换好一点的DNA酶，另可用水浴锅控温
赞一下 回复此楼
our story begins
6楼2016-01-28 10:42:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 紫萸香慢001 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 3/150 2026-02-08 03:05 by vs90ilomwc
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 4/200 2026-02-08 02:45 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 3/150 2026-02-08 02:32 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 5/250 2026-02-08 02:27 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 5/250 2026-02-08 02:25 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 5/250 2026-02-08 02:12 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 02:07 by vs90ilomwc
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 01:46 by vs90ilomwc
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 01:45 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 01:32 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 01:26 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 01:12 by vs90ilomwc
[教师之家] 有院领导为了换新车，用横向课题经费买了俩车 +7 瞬息宇宙 2026-02-04 7/350 2026-02-07 21:47 by tfang
[有机交流] 酰胺脱乙酰基 10+5 chibby 2026-02-03 12/600 2026-02-07 19:29 by 江东闲人
[基金申请] 同年申请2项不同项目，第1个项目里不写第2个项目的信息，可以吗 +4 hitsdu 2026-02-06 4/200 2026-02-07 13:07 by jurkat.1640
[基金申请] 有时候真觉得大城市人没有县城人甚至个体户幸福 +9 苏东坡二世 2026-02-04 10/500 2026-02-07 12:37 by 小毛球
[公派出国] CSC & MSCA 博洛尼亚大学能源材料课题组博士/博士后招生｜MSCA经费充足、排名优 +4 雨念 2026-02-01 6/300 2026-02-06 23:32 by MelissaPon
[基金申请] 面上项目申报 +3 Tide man 2026-02-01 3/150 2026-02-05 22:56 by god_tian
[硕博家园] 博士延得我，科研能力直往上蹿 +7 偏振片 2026-02-02 7/350 2026-02-04 17:36 by 陈氏帝国
[教师之家] 遇见不省心的家人很难过 +18 otani 2026-02-03 22/1100 2026-02-04 11:06 by tangmnt
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭