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胡程

银虫 (小有名气)
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19楼: Originally posted by 自然茶 at 2015-12-27 23:36:54
amp我配制浓度是100mg/ml，等体积「一般会多加点」加到培养基，倒平板。然后涂平板。有问题吗
...

技术员做的，一直没问题，我现在开始重新倒平板。谢谢
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做最好的自己
31楼2015-12-29 11:13:53
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胡程

银虫 (小有名气)
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22楼: Originally posted by lj2013601157 at 2015-12-27 23:55:01
培养基有问题吗

我觉得无抗LB可能有问题，不过做了对照，排出了。我就不知道了
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做最好的自己
32楼2015-12-29 11:14:41
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胡程

银虫 (小有名气)
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24楼: Originally posted by elric at 2015-12-28 03:27:04
你涂布前一步，有离心操作，好像是不需要的。平板上可能是菌太浓了，你不要离心，直接取10ul涂布试试...

嗯嗯  谢谢  我试了  可是还是老样子
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做最好的自己
33楼2015-12-29 11:15:15
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胡程

银虫 (小有名气)
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25楼: Originally posted by elric at 2015-12-28 03:29:25
那会不会是感受态细胞问题？连接问题也可能？只要做好对照，就可以找出问题了。感受态问题，看看其他人用同批次感受态，结果如何？连接问题，你可以直接用载体plasmid转一下试试。...

谢谢，您所说的都做了，我转了空载体，也是这样，另外，同批次的其他人长出来了
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做最好的自己
34楼2015-12-29 11:15:59
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胡程

银虫 (小有名气)
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27楼: Originally posted by heianduck at 2015-12-28 08:21:17
我连接一般连两个小时以上，转化冰浴30min ,42热击90s，再冰浴3min，之后240转摇90~120min，平板本身要吹干，培养12~15h，都没问题

嗯  谢谢  我基本是按照这个  觉得这里不是问题  已经按照对照重新排除  我现在重新做
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做最好的自己
35楼2015-12-29 11:16:56
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胡程

银虫 (小有名气)
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28楼: Originally posted by zht930528 at 2015-12-28 11:49:48
说下我们这里的操作，之前的都一样，然后42℃热激90s  ，之后是有一个5min的冰浴的，然后再加无抗LB复苏40min-60min。之后离心涂板。建议检查amp。感觉像是抗生素失效。或者菌液复苏导致浓度过高

谢谢，我做了一个直接涂板的对照（没有离心）和amp的对照，然而同样的结果，我在怀疑是以前的操作引来的。
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做最好的自己
36楼2015-12-29 11:18:37
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胡程

银虫 (小有名气)
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14楼: Originally posted by yilberg at 2015-12-27 16:11:29
菌的话看浓度的。不一定严格4小时。我一般隔一小时看一次。浓度差不多了 就涂
...

我是1ml的菌液摇40min。离心涂板的。谢谢您的回答
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做最好的自己
37楼2015-12-29 11:20:28
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haooy111

禁虫 (正式写手)
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38楼2015-12-29 11:54:52
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haooy111

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
39楼2015-12-29 11:55:03
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haooy111

禁虫 (正式写手)
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40楼2015-12-29 11:55:56
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