| 查看: 14070 | 回复: 18 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
1002432022金虫 (小有名气)
|
[求助]
请教一个酵母单杂交的问题 已有2人参与
|
||
|
最近做单杂实验发现一个怪问题，我做点对点的。我把要验证的转录因子构建到pGADT7-rec2载体上，与pHis2的空载共同转化Y187，本来要拿这个做阴性对照的，可是在三缺板子上长得很欢乐呀，加了3AT，并且已经加的浓度很高了，还是生长！但是我的实验组，就是转录因子构建到pGADT7-rec2载体上，目标启动子构建到pHis2载体上共同转化Y187，在三缺板上长，加了3AT之后反倒不长了！有没有大神遇到过类似问题，或者帮忙解释一下？ 还有一点，我看了pHIS2的序列，在HIS3前面，Pmin区域里也有我的转录因子结合位点，会不会是我的转录因子结合到那里去了？不知道有没有这个可能性啊？这个minimum promoter是不是只有GAL4AD才能结合呢？如果非要做，这段区域能不能改造呢？求指点啊~ 还有，我也试过了pAbAi系统的，一样的问题，只转了空载pAbAi，然后再把我的转录因子构建在pGADT7上，转化，AbA已经加到3ug/ml了，还是生长！求指点这种激活空载的问题怎么解决啊~~~ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 生物科学系列 |
» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有87人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
寒冰利剑
金虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1098.3
- 散金: 67
- 红花: 1
- 帖子: 150
- 在线: 60.2小时
- 虫号: 1367946
- 注册: 2011-08-14
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
|
你好，我最近也在做酵母单杂交，用的是y187，之前实验室可能把酵母菌污染了，之后划线，酵母菌落长得很快，菌落形态不太一样，因此，想问问酵母单杂可不可以用AH109，质粒用的是PGADT 7和phis 2载体。 发自小木虫Android客户端 |
10楼2016-11-26 11:03:42
2楼2016-01-14 15:29:38
1002432022
金虫 (小有名气)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 614.8
- 散金: 352
- 红花: 8
- 帖子: 234
- 在线: 148.3小时
- 虫号: 2135675
- 注册: 2012-11-19
- 性别: MM
- 专业: 细胞信号转导
3楼2016-02-04 19:53:25
张凡云
至尊木虫 (职业作家)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 13434.7
- 散金: 3094
- 红花: 13
- 帖子: 4124
- 在线: 1488.1小时
- 虫号: 2426111
- 注册: 2013-04-19
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
4楼2016-02-05 08:42:12
