24小时热门版块排行榜    

查看: 1481  |  回复: 31
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wanglixia815

新虫 (正式写手)

[求助] 高手进来看看,帮忙解决问题,非常感谢 已有5人参与

我做DNA提取和PCR,我的DNeasy plant mini kit 和primer都是2014年2月买的,引物稀释之后,一直在零下20度放着,今天做PCR。发现marker是清楚的。但是样品条带很模糊。。是不引物降解了?第一个图是用DNA样品跑的。带很清楚,应该mini kit是没有问题,还可以继续使用,但是第二张图pcr产物,marker清楚。但是样品条带很模糊,然后我用引物跑了一遍,第二张第二行,那四条带,也很模糊,是不说明引物降解了?还是还有别的问题?

高手进来看看,帮忙解决问题,非常感谢


高手进来看看,帮忙解决问题,非常感谢-1


发自小木虫IOS客户端
回复此楼
有点矛盾。有点纠结
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanglixia815

新虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by wangxiaoguo at 2015-12-20 17:55:48
应该是引物的问题,最好重新合成试试,如果还是这样的话,可能dna有轻微降解。

我DNA是新提取的呀,,不过我的plant  mini kit, 放了快两年了 但是你看我的第张图,是我用DNA模板跑的胶  是没有问题的呀
有点矛盾。有点纠结
11楼2015-12-20 18:52:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 32 个回答

我欲乘风归去

木虫 (正式写手)

引物没有问题,片段也扩增出来了,可能是制胶过程中胶冷却的不均匀造成的,建议重新做快胶电泳时间跑长点。
2楼2015-12-19 12:58:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanglixia815

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 我欲乘风归去 at 2015-12-19 12:58:22
引物没有问题,片段也扩增出来了,可能是制胶过程中胶冷却的不均匀造成的,建议重新做快胶电泳时间跑长点。

但是j我的marker很清楚呀,胶有问题,marker应该也不清楚吧

发自小木虫IOS客户端
有点矛盾。有点纠结
3楼2015-12-19 14:59:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanglixia815

新虫 (正式写手)

对了,用mili q water没有问题吧,在做pcr的时候,

发自小木虫IOS客户端
有点矛盾。有点纠结
4楼2015-12-19 15:11:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见