应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助
51/1返回列表
查看: 1023  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

取个什么名啊

木虫 (正式写手)

[求助] 求助 已有2人参与

我最近要做荧光定量PCR,现在已经逆转录完了，准备做荧光定量。有几个问题想问一下大家： 1．我同时逆转录了4管，其中有一管放-20也是液体，另外三管能够冻住，想问一下这是怎么回事？
2.我之前设计的引物以cDNA为模板能够出单带，没有引物二聚体，现在在做有引物二聚体，这是怎么回事？

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-12-17 20:55:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚：专业/专注/专心
高品质2×逆转录MIX，操作方便简单，RT反应只需加入模板和水，免费试用申请进行中，有意请PM哦······
赞一下 回复此楼
年末优惠荧光定量pcr、WB、ELISA技术服务一律六折！交流锤炼知识，用心构筑桥梁，以更优质的产品及技术服务助力科研；QQ：2513165427；Email：b
3楼2016-04-25 17:06:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

取个什么名啊

木虫 (正式写手)
大神们帮帮忙解答啊！

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2015-12-17 23:01:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

804371539

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

和RNA质量有关吧，再就是提高退火温度试试。
赞一下 回复此楼
4楼2016-04-25 18:16:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

菜头Q

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

其实从经验来看，RNA做荧光定量还是用一步法比较好。
1.关于某管呈液体，其余三管为固体，建议你以后把RNA或cDNA冻存在-80冰箱，并且避免反复冻融使用。如果放在-20的话，一个是避免反复冻融，一个是要放得离冰箱门远点，你可以测一下近门和远门位置的温度。
2.可能模板降解了。
赞一下 回复此楼
5楼2016-04-25 21:23:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +12 医学老男孩 2026-08-13 31/1550 2026-08-14 07:47 by 医学老男孩
[考博] 澳大利亚 Murdoch University 全奖博士招生（3个名额）地质化工冶金领域 +69 AI8RaGaPaSCR 2026-08-07 72/3600 2026-08-14 07:45 by u5Hy7ZmCpaka
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +3 启萌科技 2026-08-12 11/550 2026-08-13 22:57 by 启萌科技
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +9 Tide man 2026-08-10 10/500 2026-08-13 20:33 by 温淼淼淼
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭