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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助
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取个什么名啊

木虫 (正式写手)

[求助] 求助 已有2人参与

我最近要做荧光定量PCR,现在已经逆转录完了，准备做荧光定量。有几个问题想问一下大家： 1．我同时逆转录了4管，其中有一管放-20也是液体，另外三管能够冻住，想问一下这是怎么回事？
2.我之前设计的引物以cDNA为模板能够出单带，没有引物二聚体，现在在做有引物二聚体，这是怎么回事？

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1楼 2015-12-17 20:55:46
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804371539

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

和RNA质量有关吧，再就是提高退火温度试试。
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4楼2016-04-25 18:16:50
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取个什么名啊

木虫 (正式写手)
大神们帮帮忙解答啊！

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2楼2015-12-17 23:01:32
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biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚：专业/专注/专心
高品质2×逆转录MIX，操作方便简单，RT反应只需加入模板和水，免费试用申请进行中，有意请PM哦······
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年末优惠荧光定量pcr、WB、ELISA技术服务一律六折！交流锤炼知识，用心构筑桥梁，以更优质的产品及技术服务助力科研；QQ：2513165427；Email：b
3楼2016-04-25 17:06:21
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菜头Q

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

其实从经验来看，RNA做荧光定量还是用一步法比较好。
1.关于某管呈液体，其余三管为固体，建议你以后把RNA或cDNA冻存在-80冰箱，并且避免反复冻融使用。如果放在-20的话，一个是避免反复冻融，一个是要放得离冰箱门远点，你可以测一下近门和远门位置的温度。
2.可能模板降解了。
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5楼2016-04-25 21:23:23
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