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取个什么名啊

木虫 (正式写手)

[求助] 求助 已有2人参与

我最近要做荧光定量PCR,现在已经逆转录完了,准备做荧光定量。有几个问题想问一下大家: 1.我同时逆转录了4管,其中有一管放-20也是液体,另外三管能够冻住,想问一下这是怎么回事?
2.我之前设计的引物以cDNA为模板能够出单带,没有引物二聚体,现在在做有引物二聚体,这是怎么回事?

发自小木虫Android客户端
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菜头Q

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

其实从经验来看,RNA做荧光定量还是用一步法比较好。
1.关于某管呈液体,其余三管为固体,建议你以后把RNA或cDNA冻存在-80冰箱,并且避免反复冻融使用。如果放在-20的话,一个是避免反复冻融,一个是要放得离冰箱门远点,你可以测一下近门和远门位置的温度。
2.可能模板降解了。
5楼2016-04-25 21:23:23
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取个什么名啊

木虫 (正式写手)

2楼2015-12-17 23:01:32
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biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚:专业/专注/专心

高品质2×逆转录MIX,操作方便简单,RT反应只需加入模板和水,免费试用申请进行中,有意请PM哦······
年末优惠荧光定量pcr、WB、ELISA技术服务一律六折!交流锤炼知识,用心构筑桥梁,以更优质的产品及技术服务助力科研;QQ:2513165427;Email:b
3楼2016-04-25 17:06:21
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804371539

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

和RNA质量有关吧,再就是提高退火温度试试。
4楼2016-04-25 18:16:50
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