24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3479  |  回复: 15

杨仔儿

木虫 (著名写手)

[求助] 原核表达的菌液反复冻融,对蛋白活性有影响吗? 已有6人参与

原核表达的菌液反复冻融,对蛋白活性有影响吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

繁夏

版主 (知名作家)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
肯定有影响。你可以把样品分成几份保存,避免反复冻融。

发自小木虫Android客户端
5楼2015-12-11 17:01:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

北国佳人

铜虫 (小有名气)

要看研究目的,,有的通过反复动融的方法,来为后续蛋白充分有效的提取
努力的小蜜蜂
6楼2015-12-12 10:39:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
冻融破碎细胞当然可以,但是过程慢,可能会发生降解,如果细胞量大的话还可以,如果是少部分细胞那就不建议这么操作。
一般来说,原核蛋白表达纯化中细胞破碎的方法就是用超声和酶解破碎,你说超声破碎不理想是什么情况?
早上一副睡不醒的样子,下午一副没睡醒的样子,晚上一副打了鸡血的样子!
11楼2015-12-14 10:13:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肖大爷1314

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

原核表达蛋白活性本身就无保证,不像真核蛋白表达,能实现蛋白的复杂修饰,和保证活性。免疫动物,是做抗体的吗?一般的原核表达蛋白就算没有活性也可以.
追求真理的道路上永远不会孤独
14楼2015-12-15 11:26:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

hc2015

新虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
当然有。有个破碎方法就是反复冻融啊,机械过程对细胞有损失,蛋白的环境变化,蛋白的活性自然有变化。祝顺利
2楼2015-12-11 13:36:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有影响的,赞同楼上的观点。祝顺利
3楼2015-12-11 13:57:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qwwzyhk

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有影响,确定。要看你的目标蛋白种类,活性等,还有反复冻融次数以及时间,我们做的,冻融一次,一周,酶活降低10%左右。
要么忍,要么残忍,要么滚。。。
4楼2015-12-11 16:13:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杨仔儿

木虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 北国佳人 at 2015-12-12 10:39:08
要看研究目的,,有的通过反复动融的方法,来为后续蛋白充分有效的提取

我要纯化蛋白,之后免疫动物,超生不是很理想,想反复冻融试试

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2015-12-12 11:38:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杨仔儿

木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 繁夏 at 2015-12-11 17:01:26
肯定有影响。你可以把样品分成几份保存,避免反复冻融。

我想纯化蛋白,但是超声破碎不理想,想反复冻融试试

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2015-12-12 11:38:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

繁夏

版主 (知名作家)

优秀版主优秀版主

额,你是存在这个意思啊!那你用酶处理!

发自小木虫Android客户端
9楼2015-12-12 11:43:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杨仔儿

木虫 (著名写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 繁夏 at 2015-12-12 11:43:26
额,你是存在这个意思啊!那你用酶处理!

我在试试吧,谢啦

[ 发自小木虫客户端 ]
10楼2015-12-12 11:57:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 杨仔儿 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 295求调剂 +4 1428151015 2026-03-27 5/250 2026-03-27 19:53 by JourneyLucky
[考研] 一志愿上海理工能源动力(085800)310分求调剂 +3 zhangmingc 2026-03-27 4/200 2026-03-27 19:01 by 给你你注意休息
[考研] 材料与化工085600,总分304,本科有两篇sci参与,求调剂 +10 幸运的酱酱 2026-03-22 12/600 2026-03-27 16:08 by muchong357
[考研] 考研化学308分求调剂 +10 你好明天你好 2026-03-23 12/600 2026-03-27 14:43 by shangxh
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-26 9/450 2026-03-27 11:10 by 不吃魚的貓
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:17 by guoweigw
[考研] 一志愿陕师大生物学071000,298分,求调剂 +5 SYA! 2026-03-23 5/250 2026-03-27 09:29 by 不吃魚的貓
[考研] 336材料求调剂 +7 陈滢莹 2026-03-26 9/450 2026-03-27 00:20 by wxiongid
[考研] 求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343 +6 13831862839 2026-03-24 7/350 2026-03-26 22:57 by 不吃魚的貓
[考研] 材料调剂 5+4 想要一壶桃花水 2026-03-25 10/500 2026-03-26 19:56 by 不吃魚的貓
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +17 RichLi_ 2026-03-25 17/850 2026-03-26 19:44 by plmuchong
[考研] 中国科学院深圳先进技术研究院-光纤传感课题组招生-中国科学院大学、深圳理工大学联培 +5 YangTyu1 2026-03-26 5/250 2026-03-26 18:27 by 猫咪猫咪呀
[考研] 材料考研求调剂 +3 Dendel 2026-03-23 6/300 2026-03-26 17:51 by fmesaito
[考研] 352求调剂 +4 大米饭! 2026-03-22 4/200 2026-03-26 16:40 by 不吃魚的貓
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:26 by 星空星月
[考研] 299求调剂 +7 某某某某位 2026-03-21 8/400 2026-03-25 20:34 by 热情沙漠
[考研] 各位老师您好:本人初试372分 +5 jj涌77 2026-03-25 6/300 2026-03-25 14:15 by mapenggao
[考研] 300求调剂,材料科学英一数二 +5 leaflight 2026-03-24 5/250 2026-03-24 16:25 by laoshidan
[考研] 石河子大学(211、双一流)硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
信息提示
请填处理意见