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杨仔儿

木虫 (著名写手)

[求助] 原核表达的菌液反复冻融,对蛋白活性有影响吗? 已有6人参与

原核表达的菌液反复冻融,对蛋白活性有影响吗?
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恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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冻融破碎细胞当然可以,但是过程慢,可能会发生降解,如果细胞量大的话还可以,如果是少部分细胞那就不建议这么操作。
一般来说,原核蛋白表达纯化中细胞破碎的方法就是用超声和酶解破碎,你说超声破碎不理想是什么情况?
早上一副睡不醒的样子,下午一副没睡醒的样子,晚上一副打了鸡血的样子!
11楼2015-12-14 10:13:21
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hc2015

新虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
当然有。有个破碎方法就是反复冻融啊,机械过程对细胞有损失,蛋白的环境变化,蛋白的活性自然有变化。祝顺利
2楼2015-12-11 13:36:42
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有影响的,赞同楼上的观点。祝顺利
3楼2015-12-11 13:57:13
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qwwzyhk

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有影响,确定。要看你的目标蛋白种类,活性等,还有反复冻融次数以及时间,我们做的,冻融一次,一周,酶活降低10%左右。
要么忍,要么残忍,要么滚。。。
4楼2015-12-11 16:13:31
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