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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
冻融破碎细胞当然可以,但是过程慢,可能会发生降解,如果细胞量大的话还可以,如果是少部分细胞那就不建议这么操作。
一般来说,原核蛋白表达纯化中细胞破碎的方法就是用超声和酶解破碎,你说超声破碎不理想是什么情况?
早上一副睡不醒的样子,下午一副没睡醒的样子,晚上一副打了鸡血的样子!
11楼2015-12-14 10:13:21
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杨仔儿

木虫 (著名写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 恶魔的左眼 at 2015-12-14 10:13:21
冻融破碎细胞当然可以,但是过程慢,可能会发生降解,如果细胞量大的话还可以,如果是少部分细胞那就不建议这么操作。
一般来说,原核蛋白表达纯化中细胞破碎的方法就是用超声和酶解破碎,你说超声破碎不理想是什么 ...

正常超声破碎后菌液会变澄清,但是我的变化很不明显

[ 发自小木虫客户端 ]
12楼2015-12-14 15:40:13
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土质1992

新虫 (初入文坛)

看蛋白稳定性了,建议你分几份

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13楼2015-12-14 23:25:35
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肖大爷1314

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

原核表达蛋白活性本身就无保证,不像真核蛋白表达,能实现蛋白的复杂修饰,和保证活性。免疫动物,是做抗体的吗?一般的原核表达蛋白就算没有活性也可以.
追求真理的道路上永远不会孤独
14楼2015-12-15 11:26:01
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杨仔儿

木虫 (著名写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 土质1992 at 2015-12-14 23:25:35
看蛋白稳定性了,建议你分几份

分几份后,把反复冻融和没有冻融的跑PAGE对比,看条带大小吗?
15楼2015-12-15 16:49:48
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杨仔儿

木虫 (著名写手)

引用回帖:
14楼: Originally posted by 肖大爷1314 at 2015-12-15 11:26:01
原核表达蛋白活性本身就无保证,不像真核蛋白表达,能实现蛋白的复杂修饰,和保证活性。免疫动物,是做抗体的吗?一般的原核表达蛋白就算没有活性也可以....

免疫动物后,采集血清,做ELISA
16楼2015-12-15 16:50:34
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