24小时热门版块排行榜    

查看: 2876  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

srr1990

新虫 (初入文坛)

[求助] 酿酒酵母破壁 已有4人参与

请问各位,有没有用酿酒酵母系统做蛋白表达的?我的是胞内表达,需要破壁,之前查过很多资料,用超声波也试过,破不开。之后用的是酸洗玻璃珠,感觉效果还不错。我不知道小虫子们都是怎么破壁的,因为要测酶活,所以还要保持蛋白的酶活性。我想知道你们都是怎么知道破壁完全的?难道都是破完后用SDS-PAGE检测看是否有条带?
还有,我破壁都是用实验室一般的涡旋振荡器,也就震荡10min左右,都是手动的,而且量也很少,每次破完上清也就200-300ul左右,怕再多破碎效果不好。请教各位,你们有没有比较好的方法?
回复此楼
严谨认真,阳光向上、执着追求自己的科研小世界
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

油桃面包

新虫 (初入文坛)

5楼2015-12-08 07:39:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

371522029

金虫 (正式写手)

小鱼儿

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
srr1990: 金币+1 2015-12-09 23:10:17
液氮碾磨当然是最好的。没有的话,我们一般用珠摩仪
2楼2015-12-08 00:16:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by 371522029 at 2015-12-08 00:16:49
液氮碾磨当然是最好的。没有的话,我们一般用珠摩仪

用lyticase消化下,效果好

发自小木虫Android客户端
3楼2015-12-08 07:31:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gnice

金虫 (正式写手)

4楼2015-12-08 07:33:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +10 Tide man 2026-08-10 11/550 2026-08-14 10:30 by 沁言学术
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +14 医学老男孩 2026-08-13 36/1800 2026-08-14 09:41 by 医学老男孩
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +4 majunge000 2026-08-11 6/300 2026-08-13 16:50 by 四季常青藤
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
信息提示
请填处理意见