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酿酒酵母破壁 已有4人参与
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请问各位，有没有用酿酒酵母系统做蛋白表达的？我的是胞内表达，需要破壁，之前查过很多资料，用超声波也试过，破不开。之后用的是酸洗玻璃珠，感觉效果还不错。我不知道小虫子们都是怎么破壁的，因为要测酶活，所以还要保持蛋白的酶活性。我想知道你们都是怎么知道破壁完全的？难道都是破完后用SDS-PAGE检测看是否有条带？ 还有，我破壁都是用实验室一般的涡旋振荡器，也就震荡10min左右，都是手动的，而且量也很少，每次破完上清也就200-300ul左右，怕再多破碎效果不好。请教各位，你们有没有比较好的方法？ |
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