应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酿酒酵母破壁
131/2返回列表12下一页
查看: 2560  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

srr1990

新虫 (初入文坛)

[求助] 酿酒酵母破壁 已有4人参与

请问各位，有没有用酿酒酵母系统做蛋白表达的？我的是胞内表达，需要破壁，之前查过很多资料，用超声波也试过，破不开。之后用的是酸洗玻璃珠，感觉效果还不错。我不知道小虫子们都是怎么破壁的，因为要测酶活，所以还要保持蛋白的酶活性。我想知道你们都是怎么知道破壁完全的？难道都是破完后用SDS-PAGE检测看是否有条带？
还有，我破壁都是用实验室一般的涡旋振荡器，也就震荡10min左右，都是手动的，而且量也很少，每次破完上清也就200-300ul左右，怕再多破碎效果不好。请教各位，你们有没有比较好的方法？
回复此楼

» 猜你喜欢
严谨认真，阳光向上、执着追求自己的科研小世界
1楼 2015-12-07 22:39:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jyifan

木虫 (小有名气)
工业上就是匀浆机加板式过滤

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
勤勉、坚持
8楼2015-12-08 08:20:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

srr1990

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 恶魔的左眼 at 2015-12-08 09:53:34
我们实验室做毕赤酵母蛋白表达，一般就是用超声破碎的
你的蛋白表达量是不是很大啊，导致的很难破碎？

表达量不大，很低。就是觉得用涡漩振荡器挺累人的，每次破出来就那么一点，手一直都随着震荡抖动着！胳膊都酸
赞一下(1人) 回复此楼
严谨认真，阳光向上、执着追求自己的科研小世界
10楼2015-12-08 23:55:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

371522029

金虫 (正式写手)

小鱼儿

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
srr1990: 金币+1 2015-12-09 23:10:17
液氮碾磨当然是最好的。没有的话，我们一般用珠摩仪
赞一下 回复此楼
2楼2015-12-08 00:16:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by 371522029 at 2015-12-08 00:16:49
液氮碾磨当然是最好的。没有的话，我们一般用珠摩仪

用lyticase消化下，效果好

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2015-12-08 07:31:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gnice

金虫 (正式写手)
溶菌酶

发自小木虫Android客户端
回复此楼
4楼2015-12-08 07:33:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

油桃面包

新虫 (初入文坛)
蜗牛酶和纤维素酶

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2015-12-08 07:39:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

397608492

新虫 (小有名气)
少量处理的话液氮研磨和珠磨都可以，大量的话高压匀浆机

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2015-12-08 07:57:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jyifan

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
srr1990: 金币+1 2015-12-09 23:12:28
我说一个不一样的，冷冻干燥，保留细胞活性，还可以接着养，但细胞通透性增加，里面的酶可以释放出来

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
勤勉、坚持
7楼2015-12-08 08:06:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们实验室做毕赤酵母蛋白表达，一般就是用超声破碎的
你的蛋白表达量是不是很大啊，导致的很难破碎？
赞一下 回复此楼
早上一副睡不醒的样子，下午一副没睡醒的样子，晚上一副打了鸡血的样子！
9楼2015-12-08 09:53:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 srr1990 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂 +7 yangfz 2026-03-17 7/350 2026-03-17 23:57 by 星空星月
[考研] 材料与化工求调剂 +6 为学666 2026-03-16 6/300 2026-03-17 20:15 by peike
[考研] 312求调剂 +4 陌宸希 2026-03-16 5/250 2026-03-17 17:09 by ruiyingmiao
[考研] 332求调剂 +6 Zz版 2026-03-13 6/300 2026-03-17 17:03 by ruiyingmiao
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +8 一鸭鸭哟 2026-03-14 10/500 2026-03-17 15:07 by 一鸭鸭哟
[考研] 一志愿211 0703方向310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by houyaoxu
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:58 by 漾漾123sun
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油！? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 招收0805（材料）调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] 337一志愿华南理工0805材料求调剂 +7 mysdl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 22:43 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 Mochaaaa 2026-03-12 7/350 2026-03-13 22:18 by 星空星月
[考研] 材料工程调剂 +9 咪咪空空 2026-03-12 9/450 2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] 求材料调剂 +5 隔壁陈先生 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:03 by 星空星月
[考研] 0856材料与化工301求调剂 +5 奕束光 2026-03-13 5/250 2026-03-13 22:00 by 星空星月
[考研] 四川大学085601材料工程专硕 初试294求调剂 +4 祝我们好在冬天 2026-03-11 4/200 2026-03-13 21:39 by peike
[考研] 314求调剂 +7 无懈可击的巨人 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:40 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ADT 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭