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酿酒酵母破壁 已有4人参与
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请问各位,有没有用酿酒酵母系统做蛋白表达的?我的是胞内表达,需要破壁,之前查过很多资料,用超声波也试过,破不开。之后用的是酸洗玻璃珠,感觉效果还不错。我不知道小虫子们都是怎么破壁的,因为要测酶活,所以还要保持蛋白的酶活性。我想知道你们都是怎么知道破壁完全的?难道都是破完后用SDS-PAGE检测看是否有条带? 还有,我破壁都是用实验室一般的涡旋振荡器,也就震荡10min左右,都是手动的,而且量也很少,每次破完上清也就200-300ul左右,怕再多破碎效果不好。请教各位,你们有没有比较好的方法? |
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【答案】应助回帖
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srr1990: 金币+1 2015-12-09 23:12:28
感谢参与,应助指数 +1
srr1990: 金币+1 2015-12-09 23:12:28
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我说一个不一样的,冷冻干燥,保留细胞活性,还可以接着养,但细胞通透性增加,里面的酶可以释放出来 发自小木虫Android客户端 |

7楼2015-12-08 08:06:48
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