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candy曼

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 凝胶回收 已有4人参与

从载体质粒上P下目的基因,条带也很亮,但是凝胶回收的时候却总是浓度很低,请教各位大神,是什么原因,我用的是biowest regular agarose G-10的凝胶,这种凝胶适合凝胶回收吗?
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马玛丽

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用的什么胶回收试剂盒?

发自小木虫IOS客户端
2楼2015-12-06 12:09:13
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candy曼

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 马玛丽 at 2015-12-06 12:09:13
用的什么胶回收试剂盒?

天根
3楼2015-12-06 12:10:52
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candy曼

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by candy曼 at 2015-12-06 12:10:52
天根

生工的也用了但是也是很低
4楼2015-12-06 12:12:56
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candy曼

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 马玛丽 at 2015-12-06 12:09:13
用的什么胶回收试剂盒?

天根的,生工的也用了,也是很低
5楼2015-12-06 12:14:02
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匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
6楼2015-12-06 12:44:56
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zhuec

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一定要等到胶块完全溶解再过柱子,可以过两次柱子,每次静置时间长一点来提高回收率

发自小木虫Android客户端
7楼2015-12-06 14:04:19
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371522029

金虫 (正式写手)

小鱼儿

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
凝胶回收,首先要切胶。切入的胶量越小,浓度越大越好。
首先我建议你用大连宝生的胶回收试剂盒。
用大梳子做胶,将全部样品大概至少要4管PCR产物的样品合并上样。胶配硬一点儿,我们是2%的胶电泳,电泳电压小一点儿,大概为50mv;电泳时间久一点儿,估计个把小时。然后晚上关灯,用手持紫外灯切胶。切下的胶越细越好,越少垃圾越好。然后用胶回收试剂盒做回收,正常操作,效果很好。你的浓度低,就是量不够,切得胶太多。
8楼2015-12-07 01:31:54
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匿名

用户注销 (著名写手)


本帖仅楼主可见
9楼2015-12-07 05:07:14
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wjasaa

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
基因长度较小的话可以加入适量异丙醇,洗脱液先预热一下效果会更好。比较容易出问题的地方一般是凝胶没有彻底溶解,或者wash buffer忘记加乙醇。
WWW.ABMGOOD.COM
10楼2015-12-07 12:15:25
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