10楼: Originally posted by 刘氏响声丸 at 2016-01-05 16:52:00
加了保护碱基对切割效率有帮助吧，你可以搜一下各酶切保护碱基的长度和酶切效率
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11楼: Originally posted by 曼陀罗的祈祷 at 2016-01-06 11:26:14
片段跟载体连不上会不会跟酶切时间有关，我加的酶切位点切出来后有平头末端也有粘性末端，我之前只连3-4个小时，这回过夜试试，转化了涂板子还没长出来...

13楼: Originally posted by a13515517892 at 2016-01-06 16:05:03
建议你先把你的pcr片段先连T载体，等T载体的质粒多了在酶切质粒做全长，引物设计的也有点问题，引物前面要和目的序列有至少15个碱基的结合，再加酶切位点再加保护碱基等

13楼: Originally posted by a13515517892 at 2016-01-06 16:05:03
建议你先把你的pcr片段先连T载体，等T载体的质粒多了在酶切质粒做全长，引物设计的也有点问题，引物前面要和目的序列有至少15个碱基的结合，再加酶切位点再加保护碱基等

15楼: Originally posted by 向日21 at 2016-01-07 09:14:00
最近一直在连T载体，可是怎么都连不上啊，转化后什么都不长
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14楼: Originally posted by 向日21 at 2016-01-07 09:13:25
我按照网上的酶切位点保护碱基表加的保护碱基，应该没有问题了啊？还是除了保护碱基还需要与我链接的质粒有同源壁？
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