| 查看: 4033 | 回复: 17 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
DH5a大肠杆菌感受态细胞 已有6人参与
|
||
|
DH5a大肠杆菌感受态细胞 CaCl2法总是做失败， 两次过夜活化实验室保存的菌株，取3ml活化好的菌液加入300ml新鲜LB液体培养基中，摇菌3小时左右，分装50ml一管，冰浴10min,4℃，6000rpm离心10min,弃上清，用6ml 0.1mol/L cacl2-mgcl2重悬, 冰浴10min,4℃，6000rpm离心10min,弃上清，再用0.4ml 0.1mol/L cacl2重悬,0.06ml无菌甘油，使之终浓度为15%，分装为0.01ml小管， -70℃保存。 使用了6支自制的感受态，加入连接产物转化后，离心发现沉淀挺多，涂板前发现混匀的菌液是乳白色，过夜培养总是长出成片的块斑，怀疑是制作感受态失败，求解答～谢谢  发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
论文投出去之前到底要不要先申请专利？被审稿周期坑过一次后的复盘
已经有8人回复
-
横向课题结题时企业突然问专利归谁，合同里没约定的话默认算谁的？
已经有22人回复
-
植物学论文润色/翻译怎么收费?
已经有161人回复
-
教师节聊点实在的：很多老师的专利正在悄悄失效
已经有22人回复
-
第一次独立答复专利审查意见，才发现这活跟毕业答辩是一个套路
已经有24人回复
-
使用QE质谱仪检测杂质含量
已经有0人回复
-
帮学院整理搁置专利清单时发现一半快到年费期，聊聊几条盘活的路子
已经有19人回复
-
师弟论文见刊大半年才想起来申请专利，还能抢救一下吗？
已经有8人回复
-
实验室折腾了三年的自制设备要不要申请专利？跟导师争了一晚上没吵明白
已经有11人回复
-
入职后第一次管课题组的专利缴费，对账才发现官费比别人多掏了一倍
已经有5人回复
18楼2017-11-20 09:46:58
2楼2015-11-30 14:50:20
jiangronglu
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 24 (小学生)
- 金币: 11992.1
- 散金: 104
- 红花: 9
- 帖子: 3110
- 在线: 356.5小时
- 虫号: 1793748
- 注册: 2012-05-03
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
此现象存在以下问题，1:感受态做的太好了，或者说转化率太高，可以取部分转化菌液涂板。2.有没有用液氮速冻后放于70度冰箱，这样更好。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2015-11-30 15:00:05
4楼2015-12-03 00:03:18