| 查看: 3955 | 回复: 17 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
DH5a大肠杆菌感受态细胞 已有6人参与
|
||
|
DH5a大肠杆菌感受态细胞 CaCl2法总是做失败， 两次过夜活化实验室保存的菌株，取3ml活化好的菌液加入300ml新鲜LB液体培养基中，摇菌3小时左右，分装50ml一管，冰浴10min,4℃，6000rpm离心10min,弃上清，用6ml 0.1mol/L cacl2-mgcl2重悬, 冰浴10min,4℃，6000rpm离心10min,弃上清，再用0.4ml 0.1mol/L cacl2重悬,0.06ml无菌甘油，使之终浓度为15%，分装为0.01ml小管， -70℃保存。 使用了6支自制的感受态，加入连接产物转化后，离心发现沉淀挺多，涂板前发现混匀的菌液是乳白色，过夜培养总是长出成片的块斑，怀疑是制作感受态失败，求解答～谢谢  发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
江苏省自然基金
已经有8人回复
-
生命科学新英文普刊《INVESTIGATION OF LIFE SCIENCE》
已经有13人回复
-
植物学论文润色/翻译怎么收费?
已经有86人回复
-
国际普刊官网征稿INVESTIGATION OF LIFE SCIENCE
已经有8人回复
-
200一版的国际普刊（新刊活动），全流程只需七天
已经有2人回复
-
适合大创赛生科赛结项，学分紧急的同学，国际新刊INVESTIGATION OF LIFE SCIENCE
已经有18人回复
-
INVESTIGATION OF LIFE SCIENCE 第三期开放投稿，审稿快、版面费低
已经有17人回复
-
新审查指南施行半年，AI方向的专利申请是不是更看"技术味"了？
已经有22人回复
-
专利优先审查新办法出了，哪些成果值得走快速预审通道？
已经有33人回复
-
新审查指南堵死了"一案双申"的老路，实用新型和发明只能二选一了？
已经有27人回复
11楼2015-12-07 00:34:11
2楼2015-11-30 14:50:20
jiangronglu
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 24 (小学生)
- 金币: 11698.3
- 散金: 104
- 红花: 9
- 帖子: 3064
- 在线: 350.9小时
- 虫号: 1793748
- 注册: 2012-05-03
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
此现象存在以下问题，1:感受态做的太好了，或者说转化率太高，可以取部分转化菌液涂板。2.有没有用液氮速冻后放于70度冰箱，这样更好。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2015-11-30 15:00:05
4楼2015-12-03 00:03:18
投票:
