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dirkyoung金虫 (正式写手)
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[求助]
免疫组化显色问题，新手求助 已有3人参与
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| 新手做免疫组化，用的是鼠源的一抗PCNA，羊抗鼠的二抗，HRP标记。DAB试剂盒显色，抗体都用ＰＢＳ按照最大浓度稀释。结果不要说真假阳性，连背景几乎都没有（封闭步骤我都已经省略了），说明书的显微镜下控制反应时间，我是什么都看不到的。用二抗液直接和显色液反应只有非常非常弱的棕色。刚好实验室有个elisa的TMB试剂盒，和二抗反应几乎瞬间变色，二抗稀释液和dab工作液反应难道不该很快变色吗？dab试剂盒用了两家的都是这个样子（博士德和中杉金桥，都算是国内不错的牌子吧）。周围没有做免疫组化的人，实在太无力了到底问题出在哪儿呢？我看很多做组化的都是纠结背景太强的问题。 |
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