应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pet28a N端去除 C端保留tag
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
91/1返回列表
查看: 2689  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

左眼

金虫 (小有名气)

[求助] pet28a N端去除 C端保留tag 已有1人参与

以pet28a为载体，表达的蛋白想保留 C端his tag（N端去除）。
想选择NcoI和XhoI,  不知道这两个酶效率怎么样？
又看到XhoI可能会导致移码，没看到原因或是到底移码多少？ 不知道应该怎么设计才能避免移码保证C端顺利表达tag。
还有看到NcoI有不同种类，想问下NcoI HF和不带HF是有什么区别吗？我应该用什么样的呢？谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-11-26 21:56:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

左眼

金虫 (小有名气)
我在NEB 网站上看见带HF的意思是酶经过。。。之后可以避免星号活性的意思是吧？
赞一下 回复此楼
2楼2015-11-26 22:15:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一个人000
赞

发自小木虫Android客户端
3楼2015-11-26 22:36:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
4楼2015-11-26 22:46:04
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

左眼

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 玉皇大帝捷哥 at 2015-11-26 22:46:04
移码很好解决的啊 一个氨基酸对应3个碱基 所以为了保证氨基酸不变你要在移码的地方人为加入碱基 酶切效率可以查看takara的产品目录那本书 有各种限制酶的双酶切效果
...

我知道三个碱基一个氨基酸 但是我不太明白为什么XhoI会导致移码？识别的序列是六个碱基，切完连上不还是六个碱基吗？XhoI是怎么导致移码的？
赞一下 回复此楼
5楼2015-11-26 23:58:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
6楼2015-11-27 00:21:16
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
7楼2015-11-27 00:22:11
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
左眼: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 谢谢~ 2015-11-27 21:05:02
不知道楼主用的哪个公司的酶，之前用过takara的这两个酶，效率没问题。楼主你应该注意NcoI的移码吧，需要在酶切位点后加2个碱基，XhoI在你说的这种情况下不会造成移码
赞一下 回复此楼
8楼2015-11-27 09:14:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zslqj

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by a86052 at 2015-11-27 09:14:43
不知道楼主用的哪个公司的酶，之前用过takara的这两个酶，效率没问题。楼主你应该注意NcoI的移码吧，需要在酶切位点后加2个碱基，XhoI在你说的这种情况下不会造成移码

你好，我想问一下pET28a载体，酶切位点选用Hind3和Xho1，会移码吗？
赞一下 回复此楼
9楼2017-05-27 13:35:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 左眼 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 266分，求材料相关专业调剂 +4 哇呼哼呼哼 2026-03-30 5/250 2026-03-30 18:09 by 哇呼哼呼哼
[考研] 材料与化工272求调剂 +21 阿斯蒂芬2004 2026-03-28 21/1050 2026-03-30 10:52 by 晴空210210
[考研] 282求调剂 +4 wcq131415 2026-03-24 4/200 2026-03-30 10:39 by Delta2012
[考研] 一志愿211，335分，0856，求调剂院校和导师 +7 倾____萧 2026-03-27 8/400 2026-03-30 09:37 by longlotian
[考研] 086000生物与医药调剂 +5 Feisty。 2026-03-28 9/450 2026-03-29 12:02 by longlotian
[硕博家园] 招收生物学/细胞生物学调剂 +4 IceGuo 2026-03-26 5/250 2026-03-29 01:25 by griffith2014
[考研] 083000学硕274求调剂 +8 Li李鱼 2026-03-26 8/400 2026-03-28 20:33 by 加油向未来啊
[考研] 食品工程专硕一志愿中海洋309求调剂 +4 小张zxy张 2026-03-26 8/400 2026-03-28 19:25 by lbsjt
[考研] 材料277求调剂 +7 min3 2026-03-24 7/350 2026-03-28 11:39 by xuxiang
[考研] 339求调剂，想调回江苏 +6 烤麦芽 2026-03-27 8/400 2026-03-28 10:40 by 烤麦芽
[考研] 292求调剂 +14 鹅鹅鹅额额额额� 2026-03-25 15/750 2026-03-28 08:45 by WYUMater
[考研] 265求调剂11408 +3 刘小鹿lu 2026-03-27 3/150 2026-03-27 20:53 by nihaoar
[考研] 266求调剂 +11 阳阳哇塞 2026-03-27 12/600 2026-03-27 17:56 by yu221
[考博] 26申博 +3 加油冲啊！ 2026-03-26 3/150 2026-03-27 15:38 by cls512
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 305求调剂 +5 哇卢卡库 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:01 by laoshidan
[考研] 调剂 +3 李嘉图·S·路 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:19 by wangjy2002
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +6 kongweilin 2026-03-26 8/400 2026-03-27 10:18 by FF_16
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭