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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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左眼

金虫 (小有名气)

[求助] pet28a N端去除 C端保留tag 已有1人参与

以pet28a为载体,表达的蛋白想保留 C端his tag(N端去除)。
想选择NcoI和XhoI,  不知道这两个酶效率怎么样?
又看到XhoI可能会导致移码,没看到原因或是到底移码多少? 不知道应该怎么设计才能避免移码保证C端顺利表达tag。
还有看到NcoI有不同种类,想问下NcoI HF和不带HF是有什么区别吗?我应该用什么样的呢?谢谢
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a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
左眼: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 谢谢~ 2015-11-27 21:05:02
不知道楼主用的哪个公司的酶,之前用过takara的这两个酶,效率没问题。楼主你应该注意NcoI的移码吧,需要在酶切位点后加2个碱基,XhoI在你说的这种情况下不会造成移码
8楼2015-11-27 09:14:43
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查看全部 9 个回答

左眼

金虫 (小有名气)

我在NEB 网站上看见带HF的意思是酶经过。。。之后可以避免星号活性的意思是吧?
2楼2015-11-26 22:15:55
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3楼2015-11-26 22:36:03
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匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
4楼2015-11-26 22:46:04
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