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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 肠激酶切割问题
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栾栾silence

银虫 (小有名气)

[求助] 肠激酶切割问题

如果用了肠激酶切割蛋白后，过高压应该有几个主峰？我过完后的图片是这个样子的，然后满心欢喜的拿了最大峰的峰尖打了质谱，可是并没有出现我的目的蛋白大小，也没有出现融合头大小的分子量，是什么问题？求各位大神！

肠激酶切割问题
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怀挺！
1楼 2015-11-26 09:50:27
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a86052

金虫 (正式写手)
是Tag？或者肠激酶？
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2楼2015-11-26 14:50:17
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栾栾silence

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by a86052 at 2015-11-26 14:50:17
是Tag？或者肠激酶？

您是说那个峰形对应的是肠激酶或者Tag吗？可是肠激酶的大小也不对应。
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怀挺！
3楼2015-11-26 15:57:01
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mataomatao

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
4楼2015-11-28 23:36:54
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栾栾silence

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by mataomatao at 2015-11-28 23:36:54
为什么不设对照，酶，酶切前蛋白出峰位置，打质谱

酶切前蛋白也过高压了，峰形基本一致。
肠激酶切割问题-1
1.png
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怀挺！
5楼2015-11-29 00:18:22
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mataomatao

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
6楼2015-11-29 00:22:26
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栾栾silence

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by mataomatao at 2015-11-29 00:22:26
你可以跑胶检测酶切是否完全？如果不完全， c4 柱分不开，打什么质谱啊

胶跑了，跑了两次，都出问题，看不到很好的条带。

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怀挺！
7楼2015-11-29 00:52:42
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栾栾silence

银虫 (小有名气)
胶跑成这个样子，很无奈，又跑了一次，还是惨不忍睹，根本看不清楚条带。
肠激酶切割问题-2



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8楼2015-11-29 00:55:21
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mataomatao

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
9楼2015-11-29 04:54:21
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