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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA转录后产物不均一，求大神指导
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beiw

银虫 (初入文坛)

[求助] RNA转录后产物不均一，求大神指导 已有1人参与

如题，做RNA transcription后，跑胶发现得到的是一个范围而不是分立的条带，更不是均一条带（当然这个好像有点困难）。且这个范围内无法找到明显的条带，有点像拖尾。求问这是什么造成的？有没有什么好方法能够得到产物条带？

我用的T7 kit，小白，第一次接触RNA。。。。。

不知为何无法上传图片，只能按上传文件了。。。
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    • 2015-11-22 09:54:49, 21.16 K

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一生所爱-cc
1楼 2015-11-22 09:55:43
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匿名

用户注销 (著名写手)
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4楼2015-11-22 10:27:56
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草溪河

铁虫 (著名写手)
cDNA跑电泳本来就是弥散的带

发自小木虫Android客户端
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2楼2015-11-22 10:03:52
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beiw

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 草溪河 at 2015-11-22 10:03:52
cDNA跑电泳本来就是弥散的带

用的不是cDNA的template，是链状的DNA，可能会有点二级结构，但是也用了尽可能少的二级结构的链去做过对比，但是是一样的结果。
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一生所爱-cc
3楼2015-11-22 10:22:10
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beiw

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sagua at 2015-11-22 10:27:56
dna没问题的话，转录后，rna有可能降解了

加了RNA inhibitor也无法抑制降解吗？每个操作都用SDS去RNase了，不知除了引入污染导致降解，还有哪些地方可能引入降解？比如转录时间太长？跑胶的过程中胶或buffer不干净？
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一生所爱-cc
5楼2015-11-22 10:46:54
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