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beiw

银虫 (初入文坛)

[求助] RNA转录后产物不均一,求大神指导 已有1人参与

如题,做RNA transcription后,跑胶发现得到的是一个范围而不是分立的条带,更不是均一条带(当然这个好像有点困难)。且这个范围内无法找到明显的条带,有点像拖尾。求问这是什么造成的?有没有什么好方法能够得到产物条带?

我用的T7 kit,小白,第一次接触RNA。。。。。

不知为何无法上传图片,只能按上传文件了。。。
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  • 2015-11-22 09:54:49, 21.16 K

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一生所爱-cc
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草溪河

铁虫 (著名写手)

2楼2015-11-22 10:03:52
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beiw

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 草溪河 at 2015-11-22 10:03:52
cDNA跑电泳本来就是弥散的带

用的不是cDNA的template,是链状的DNA,可能会有点二级结构,但是也用了尽可能少的二级结构的链去做过对比,但是是一样的结果。
一生所爱-cc
3楼2015-11-22 10:22:10
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匿名

用户注销 (著名写手)

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4楼2015-11-22 10:27:56
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beiw

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by sagua at 2015-11-22 10:27:56
dna没问题的话,转录后,rna有可能降解了

加了RNA inhibitor也无法抑制降解吗?每个操作都用SDS去RNase了,不知除了引入污染导致降解,还有哪些地方可能引入降解?比如转录时间太长?跑胶的过程中胶或buffer不干净?
一生所爱-cc
5楼2015-11-22 10:46:54
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匿名

用户注销 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
beiw: 金币+5, 有帮助, 感谢,下次我注意下,看看会不会有好结果 2015-11-22 12:53:42
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6楼2015-11-22 10:57:34
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匿名

用户注销 (著名写手)

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7楼2015-11-22 11:08:39
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