24小时热门版块排行榜    

查看: 1636  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

meiguiruier

金虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE 求救! 已有3人参与

最近一直在跑SDS-PAGE,做的是土壤蛋白,浓度真的很低,而且,带完全就不亮,或者说根本看不出来有带,旁边的是我点了牛血清蛋白的样2mg/ml,点了20ul,但是从第三条带开始就不清楚了,我是10%分离胶,120V,25mA,样品浓度1.45mg/ml,点了40ul,请问这样有没有问题,而且,如果进行纯化的话,应该选择什么样的试剂盒进行纯化?大神求救!!!!!

SDS-PAGE 求救!
1D328DFCC19F0CF516D49A03B8A3520D.png
回复此楼
多多交流,共同进步
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

科学小覃

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by meiguiruier at 2015-11-18 13:56:35
我是用紫外分光光度法测的浓度,蛋白中有杂质...

建议试一下用乙醇沉淀样品,一来可以浓缩,二可去除部分脂类杂质。
生物科学
6楼2015-11-19 08:04:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

贾招圆

新虫 (小有名气)

两侧的,你的样品浓度太高,可以试着降低浓度,另外,你的胶底色太重,脱色没有脱好,。你土壤蛋白跑胶出不来是因为你的土壤蛋白浓度太低吧~建议增大上样量,做纯化,我接触的只有色谱柱,要做色谱柱的话,先分析你的目的蛋白性质,比如,等电点,分子量等等~~条件要摸索的~

发自小木虫Android客户端
2楼2015-11-18 11:20:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

meiguiruier

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 贾招圆 at 2015-11-18 11:20:58
两侧的,你的样品浓度太高,可以试着降低浓度,另外,你的胶底色太重,脱色没有脱好,。你土壤蛋白跑胶出不来是因为你的土壤蛋白浓度太低吧~建议增大上样量,做纯化,我接触的只有色谱柱,要做色谱柱的话,先分析你 ...

如果用试剂盒,是不是也要分析的我蛋白质性质?我的单板浓度就是太低了,而且杂质很多,想做一下纯化,最近正在看,但是时间有点紧迫,所以想直接买试剂盒纯化~
多多交流,共同进步
3楼2015-11-18 12:05:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

科学小覃

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
样品浓度1.45mg/ml已经很高了,但从胶面上看却没有蛋白,不知楼主样品中是否含有非蛋白杂质?
生物科学
4楼2015-11-18 13:16:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 27博士 +6 锦鲤送福至 2026-11-10 6/300 2026-11-14 21:23 by xupeii
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 XJXMuRjD7cK7 2026-11-13 3/150 2026-11-14 12:51 by KXypaGgBBlw7
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 czAiolzR0IJC 2026-11-10 6/300 2026-11-12 16:55 by zzy933268
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-11 5/250 2026-11-12 11:44 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 5/250 2026-11-12 11:25 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 czAiolzR0IJC 2026-11-10 8/400 2026-11-12 11:11 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 7/350 2026-11-12 10:16 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 10/500 2026-11-12 09:52 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +8 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 12/600 2026-11-12 09:21 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 3/150 2026-11-12 07:53 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 6/300 2026-11-12 07:09 by 9fOTqj074tIg
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 5/250 2026-11-12 06:14 by 9fOTqj074tIg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 5/250 2026-11-12 06:03 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 6/300 2026-11-12 05:41 by 9fOTqj074tIg
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 7/350 2026-11-12 05:39 by 9fOTqj074tIg
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 10/500 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 9/450 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:00 by 9fOTqj074tIg
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 7/350 2026-11-12 00:44 by 9fOTqj074tIg
信息提示
请填处理意见