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919547443

金虫 (小有名气)

[求助] 请教各位液相的峰出现这种情况是怎么回事? 已有2人参与

我的流动相是       A含有0.1%的甲酸,B是0.1甲酸的甲醇
洗脱是:0-5       A 100%  B  0
              5-25    A 0          B  100%
             25-35   A 100%    B  0
              35-60  A  100%   B  0
测的是橙皮苷
这个是我跑的溶剂  DMSO ,, 我想问的是后期35-55min那种情况的峰是什么原因引起的?用的都是色谱纯的,都过滤了

请教各位液相的峰出现这种情况是怎么回事?
IMG_20151115_161717.jpg
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shenyingbin

铁杆木虫 (著名写手)

海猫

【答案】应助回帖

★ ★
919547443: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-11-21 17:17:38
引用回帖:
5楼: Originally posted by 919547443 at 2015-11-16 09:07:51
跑空针指的是跑一针溶剂吗?这就是我跑的溶剂。因为后续要做核磁所以要用dmso。紫外测定波长是285nm
可是我跑的是样品的话,在36分钟左右会出峰,应该是我的样品峰,我用的是橙皮苷标品做的,应该不会存在混合组分 ...

前面13.14.15min应该是溶剂峰,杂峰如果不影响后边样品的测定也是没关系的,你的这个标品比较好,杂峰很少,一般的标品也会有杂峰。对了,你试试520,这个是测定花色苷的波长,这个可能会排除杂峰。试试唄
第二个图定量定性测定问题不大,基本没有干扰峰,有也是分开的,不是目标物。后面不用管,直接设置洗柱子即可。一点意见,仅供参考。
既往不恋,纵情向前!
7楼2015-11-16 11:26:57
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shenyingbin

铁杆木虫 (著名写手)

海猫

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
第一、跑一针空针看下,最好先把基线跑平。
第二、DMSO是溶剂样品的吗?最好能用流动相溶解你的样品和标样,这样可以排除你提取溶剂DMSO的影响。
第三、后面35min以后应该是个混合成分,没有分开,全在一起,所以你要跑空针,排查下原因。
第四、根据测定的成分,选择合适的紫外波长,这个也有影响。
既往不恋,纵情向前!
2楼2015-11-15 18:09:42
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sytucom

版主 (知名作家)

日光之下,并无新事

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
919547443: 金币+8, ★★★很有帮助 2015-11-21 17:17:09
25分钟以后是柱子平衡的过程,也就是25分钟以后出来的东西,不代表任何东西。
其次,你的实验条件设计的很不合理,没有冲洗柱子的过程,平衡时间太长。建议25-35修改为0 100. 然后35-45 100, 0. 即可。
已有的事,后必再有,已行的事,后必再行。
3楼2015-11-15 18:36:19
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919547443

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by sytucom at 2015-11-15 18:36:19
25分钟以后是柱子平衡的过程,也就是25分钟以后出来的东西,不代表任何东西。
其次,你的实验条件设计的很不合理,没有冲洗柱子的过程,平衡时间太长。建议25-35修改为0 100. 然后35-45 100, 0. 即可。

可是我跑的是样品的话,在36分钟左右会出峰,应该是我的样品峰,我用的是橙皮苷标品做的
请教各位液相的峰出现这种情况是怎么回事?-1
O4`@HW617{719@]@ICC$Y2P.png

4楼2015-11-16 09:05:15
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