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919547443

金虫 (小有名气)

[求助] 请教各位液相的峰出现这种情况是怎么回事？ 已有2人参与

我的流动相是       A含有0.1%的甲酸，B是0.1甲酸的甲醇
洗脱是：0-5       A 100%  B  0
              5-25    A 0          B  100%
             25-35   A 100%    B  0
              35-60  A  100%   B  0
测的是橙皮苷
这个是我跑的溶剂  DMSO ，， 我想问的是后期35-55min那种情况的峰是什么原因引起的？用的都是色谱纯的，都过滤了

请教各位液相的峰出现这种情况是怎么回事？
IMG_20151115_161717.jpg
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1楼 2015-11-15 17:03:51
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919547443

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shenyingbin at 2015-11-15 18:09:42
第一、跑一针空针看下，最好先把基线跑平。
第二、DMSO是溶剂样品的吗？最好能用流动相溶解你的样品和标样，这样可以排除你提取溶剂DMSO的影响。
第三、后面35min以后应该是个混合成分，没有分开，全在一起，所以 ...

跑空针指的是跑一针溶剂吗？这就是我跑的溶剂。因为后续要做核磁所以要用dmso。紫外测定波长是285nm
可是我跑的是样品的话，在36分钟左右会出峰，应该是我的样品峰，我用的是橙皮苷标品做的，应该不会存在混合组分吧？
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5楼2015-11-16 09:07:51
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shenyingbin

铁杆木虫 (著名写手)

海猫

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第一、跑一针空针看下，最好先把基线跑平。
第二、DMSO是溶剂样品的吗？最好能用流动相溶解你的样品和标样，这样可以排除你提取溶剂DMSO的影响。
第三、后面35min以后应该是个混合成分，没有分开，全在一起，所以你要跑空针，排查下原因。
第四、根据测定的成分，选择合适的紫外波长，这个也有影响。
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既往不恋，纵情向前！
2楼2015-11-15 18:09:42
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sytucom

版主 (知名作家)

日光之下，并无新事

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
919547443: 金币+8, ★★★很有帮助 2015-11-21 17:17:09
25分钟以后是柱子平衡的过程，也就是25分钟以后出来的东西，不代表任何东西。
其次，你的实验条件设计的很不合理，没有冲洗柱子的过程，平衡时间太长。建议25-35修改为0 100. 然后35-45 100， 0. 即可。
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已有的事，后必再有，已行的事，后必再行。
3楼2015-11-15 18:36:19
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919547443

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sytucom at 2015-11-15 18:36:19
25分钟以后是柱子平衡的过程，也就是25分钟以后出来的东西，不代表任何东西。
其次，你的实验条件设计的很不合理，没有冲洗柱子的过程，平衡时间太长。建议25-35修改为0 100. 然后35-45 100， 0. 即可。

可是我跑的是样品的话，在36分钟左右会出峰，应该是我的样品峰，我用的是橙皮苷标品做的
请教各位液相的峰出现这种情况是怎么回事？-1
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4楼2015-11-16 09:05:15
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