| 查看: 5648 | 回复: 7 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[求助]
原核生物的CDS序列和SD序列（NCBI） 已有2人参与
|
||||
|
最近开始进行质粒构建，查阅NCBI找到了相关基因的阅读框，也就是CDS序列，但为什么有的不是atg开头的呢？居然是gtg开头的，而且就像图中所给的CDS序列，它的核糖体结合位点又是什么？该怎么确定呢？我需要找到每个基因的核糖体结合位点，一并导入质粒（有这个必要吗？我怕不表达）。 我的实验需要导入三段基因A,B,C，有A,B两段基因的转录方向是一致的，C是相反的，而它们在原基因上是以C,A,B的顺序排列的（A和C之间间隔的有其它基因，但它们同属一个基因簇），我在导入质粒的时候是否要遵循其排列的方向？ 而且我是不是在设计C基因引物的时候要反着来看C基因的序列？ 刚开始做这一块儿，已经纠结了一周了。求各位老师和大神们多多指点。  A.png  B.png  C.png |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 核酸方面 | 分子克隆实验交流 |
» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有147人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请问如何查找微生物的组成型启动子
已经有0人回复
- 【跪求指教！】NCBI提交编码蛋白的基因序列出现ERROR（有终止密码子）
已经有5人回复
- 英文翻译润色
已经有1人回复
gwooo
木虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 4235.1
- 红花: 1
- 帖子: 165
- 在线: 35小时
- 虫号: 4144205
- 注册: 2015-10-14
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传学
8楼2015-11-19 18:16:21
gwooo
木虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 4235.1
- 红花: 1
- 帖子: 165
- 在线: 35小时
- 虫号: 4144205
- 注册: 2015-10-14
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传学
2楼2015-11-13 17:50:15
gzbjzjchen
铜虫 (小有名气)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 356.9
- 红花: 2
- 帖子: 110
- 在线: 41.1小时
- 虫号: 2864928
- 注册: 2013-12-11
- 专业: 免疫生物学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
陈硕: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-11-16 08:52:26
感谢参与，应助指数 +1
陈硕: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-11-16 08:52:26
|
原核生物有的开始是gug,正常 发自小木虫Android客户端 |
3楼2015-11-15 18:23:58
|
谢谢老师！我做的的确是放线菌，而且是在原始菌株中表达，但我还是有不明白的地方，因为C基因它的表达方向和A,B的不一样（基因簇上面的箭头方向是相反的），当把C基因与A,B串联在一起的时候，我应该需要"倒着"去将C基因与A,B连接上吧？此外这三个基因共用一个启动子。 图片A的核糖体结合位点：ggagg 图片B的核糖体结合位点应该是aggaga吧 图片C的核糖体结合位点是什么呢？（C基因的转录表达方向是相反的，反着看序列，发现不好确定，是第19位的ggag吗？） 因为这三个基因里A,B是挨着的，我准备把它们都PCR出来连接在T载体上，再将3个串联基因酶切下来，导入整合型质粒，最终导入链霉菌中。这样做应该可行。 |
4楼2015-11-16 09:11:59