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hong_lue

木虫 (小有名气)


[交流] 昆虫表达重组bacmid质粒通用引物M13进行pcr

我最近在做昆虫表达,但是PCR验证总出问题。
在DH 10bac里产生重组质粒,用的pFastBac Dual和pFastBac HTA转入DH 10bac感受肽中。通过蓝白斑二次筛选出白克隆,用通用引物M13: F  5'-CCCAGTCACGACGTTGTAAAACG-3'
R    5'-AGCGGATAACAATTTCACACAGG-3'按照invitrogen的说明做的。用的pfu酶菌液pcr,总是出现很亮的引物二聚条带,而且目的基因在3400和4800,条带位置也不正确。结果很不稳定。
求交流求指教

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MAYINGTAI

铁杆木虫 (著名写手)



hong_lue(金币+1): 谢谢参与
5楼2015-11-12 14:27:26
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MAYINGTAI

铁杆木虫 (著名写手)



hong_lue(金币+1): 谢谢参与
4楼2015-11-12 14:27:13
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MAYINGTAI2楼
2015-11-12 14:26   回复  
hong_lue(金币+1): 谢谢参与
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MAYINGTAI3楼
2015-11-12 14:26   回复  
hong_lue(金币+1): 谢谢参与
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假大空13楼
2015-11-12 14:42   回复  
hong_lue(金币+1): 谢谢参与
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