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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 昆虫表达重组bacmid质粒通用引物M13进行pcr
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hong_lue

木虫 (小有名气)

[交流] 昆虫表达重组bacmid质粒通用引物M13进行pcr

我最近在做昆虫表达，但是PCR验证总出问题。
在DH 10bac里产生重组质粒，用的pFastBac Dual和pFastBac HTA转入DH 10bac感受肽中。通过蓝白斑二次筛选出白克隆，用通用引物M13: F  5'－CCCAGTCACGACGTTGTAAAACG-3'
R    5'－AGCGGATAACAATTTCACACAGG-3'按照invitrogen的说明做的。用的pfu酶菌液pcr，总是出现很亮的引物二聚条带，而且目的基因在3400和4800，条带位置也不正确。结果很不稳定。
求交流求指教

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1楼 2015-11-12 14:07:25
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MAYINGTAI

铁杆木虫 (著名写手)
★
hong_lue(金币+1): 谢谢参与
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4楼2015-11-12 14:27:13
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MAYINGTAI

铁杆木虫 (著名写手)
★
hong_lue(金币+1): 谢谢参与
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5楼2015-11-12 14:27:26
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MAYINGTAI2楼
2015-11-12 14:26   回复  
hong_lue(金币+1): 谢谢参与
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MAYINGTAI3楼
2015-11-12 14:26   回复  
hong_lue(金币+1): 谢谢参与
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假大空13楼
2015-11-12 14:42   回复  
hong_lue(金币+1): 谢谢参与
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