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昆虫表达重组bacmid质粒通用引物M13进行pcr
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我最近在做昆虫表达,但是PCR验证总出问题。 在DH 10bac里产生重组质粒,用的pFastBac Dual和pFastBac HTA转入DH 10bac感受肽中。通过蓝白斑二次筛选出白克隆,用通用引物M13: F 5'-CCCAGTCACGACGTTGTAAAACG-3' R 5'-AGCGGATAACAATTTCACACAGG-3'按照invitrogen的说明做的。用的pfu酶菌液pcr,总是出现很亮的引物二聚条带,而且目的基因在3400和4800,条带位置也不正确。结果很不稳定。 求交流求指教 发自小木虫Android客户端 |
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