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hong_lue

木虫 (小有名气)


[交流] 昆虫表达重组bacmid质粒通用引物M13进行pcr

我最近在做昆虫表达,但是PCR验证总出问题。
在DH 10bac里产生重组质粒,用的pFastBac Dual和pFastBac HTA转入DH 10bac感受肽中。通过蓝白斑二次筛选出白克隆,用通用引物M13: F  5'-CCCAGTCACGACGTTGTAAAACG-3'
R    5'-AGCGGATAACAATTTCACACAGG-3'按照invitrogen的说明做的。用的pfu酶菌液pcr,总是出现很亮的引物二聚条带,而且目的基因在3400和4800,条带位置也不正确。结果很不稳定。
求交流求指教

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MAYINGTAI

铁杆木虫 (著名写手)



hong_lue(金币+1): 谢谢参与
4楼2015-11-12 14:27:13
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MAYINGTAI

铁杆木虫 (著名写手)



hong_lue(金币+1): 谢谢参与
5楼2015-11-12 14:27:26
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tableman

木虫之王 (文学泰斗)



hong_lue(金币+1): 谢谢参与
祝福楼主了。
21楼2015-11-12 14:54:11
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MAYINGTAI2楼
2015-11-12 14:26   回复  
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MAYINGTAI3楼
2015-11-12 14:26   回复  
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hydzp6楼
2015-11-12 14:27   回复  
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a
dmbb7楼
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中山羊9楼
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假大空13楼
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tzynew17楼
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cxjzly200826楼
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ChaoXs_Li29楼
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。。 发自小木虫Android客户端
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ylheping34楼
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TaoH38楼
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