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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 求助，蛋白电泳样品的处理方法
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匿名

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1楼 2015-10-24 21:04:09
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合法侃侃

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弦山小栗: 金币+2 2015-10-25 10:58:09
跑蛋白胶麽？我是用5微升5×loading buffer跟20ul蛋白，混匀，沸水浴5min

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2楼2015-10-25 00:26:16
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hc-material

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弦山小栗: 金币+4 2015-10-30 19:31:22
建议你在分离胶上面加浓缩胶，另外胶跑成这样子，是电泳缓冲液的问题，建议把电泳槽洗干净，重新配新的电泳缓冲液。另外跑胶时，电压浓缩胶最后小于80，分离胶小于120.破碎，一般，冰浴中超3秒，停5秒，400W功率，超多长时间看你样品的浓度和体积。祝顺利。
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12楼2015-10-26 09:17:25
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Anew365

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弦山小栗: 金币+2 2015-10-25 10:58:22
怎么还有梳尺啊，分离胶没割掉吗？浓缩胶浓缩的不是太好啊！

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3楼2015-10-25 08:01:52
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新虫 (小有名气)
★ ★
弦山小栗: 金币+2 2015-10-25 10:58:39
确实不太好

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4楼2015-10-25 08:31:06
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baowanrui110
★
弦山小栗: 金币+1 2015-10-30 19:29:26
5楼2015-10-25 09:16:38
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匿名

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6楼2015-10-25 10:51:27
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匿名

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7楼2015-10-25 10:57:33
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合法侃侃

铁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
弦山小栗: 金币+3 2015-10-30 19:29:53
引用回帖:
6楼: Originally posted by 弦山小栗 at 2015-10-25 10:51:27
之前破碎是怎么做的，求详细步骤...

破碎用超声破碎，具体时间要摸索，我用开5s，停10s，总时间5min，功率30%。

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8楼2015-10-25 14:54:14
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Anew365

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弦山小栗: 金币+2 2015-10-30 19:30:35
引用回帖:
7楼: Originally posted by 弦山小栗 at 2015-10-25 10:57:33
梳齿是什么意思，我分离胶是用水封的，有影响吗？求详细破碎点样及电泳操作步骤。...

一般条带都在浓缩胶里，分离胶都是丢掉的。和什么封木有关系啦！

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9楼2015-10-25 19:27:33
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小小细胞啊

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我是打3停5，5min，功率25％

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10楼2015-10-25 21:11:11
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