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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 求助，蛋白电泳样品的处理方法
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hc-material

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弦山小栗: 金币+2 2015-10-30 19:30:58
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9楼: Originally posted by Anew365 at 2015-10-25 19:27:33
一般条带都在浓缩胶里，分离胶都是丢掉的。和什么封木有关系啦！
...

条带在分离胶里，浓缩胶只是防止样品跑出来太分散。
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11楼2015-10-26 09:13:57
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hc-material

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弦山小栗: 金币+4 2015-10-30 19:31:22
建议你在分离胶上面加浓缩胶，另外胶跑成这样子，是电泳缓冲液的问题，建议把电泳槽洗干净，重新配新的电泳缓冲液。另外跑胶时，电压浓缩胶最后小于80，分离胶小于120.破碎，一般，冰浴中超3秒，停5秒，400W功率，超多长时间看你样品的浓度和体积。祝顺利。
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12楼2015-10-26 09:17:25
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Jeanya
13楼2015-10-26 09:27:13
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匿名

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14楼2015-10-27 06:22:56
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宇文诗畅

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浓缩胶的配制应该出现了问题，样品都没有被压缩成一条带，还有就是样品蛋白应该杂质太多，另外再重新配下电泳缓冲液，样品蛋白的处理嘛，如果是2x的loading buffer，就跟样品蛋白等体积混合，如果是5x的，就跟样品蛋白1:4的体积比混合，混合好后在沸水中煮3-5min，最后就希望楼主实验顺利了！
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弦山小栗
做好自己的事！
15楼2015-10-27 08:51:21
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匿名

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16楼2015-10-30 19:32:20
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hc-material

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引用回帖:
11楼: Originally posted by hc-material at 2015-10-26 09:13:57
条带在分离胶里，浓缩胶只是防止样品跑出来太分散。...

对了。一着急说反了。
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17楼2015-11-02 08:48:39
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