| 查看: 1445 | 回复: 10 | |||
[求助]
想问下各位虫友，这样的RNA能用么 已有1人参与
|
|||
|
小女子刚开始提取RAN，材料来源于鱼体肝脏、脾脏和肠黏膜。我是取样后直接将组织放在TRIZOL中的。 所用匀浆器是180℃烘烤8个小时，枪头是买的现成RNase free，所用水（75%酒精和电解液）都是1-2%DEPC水搅拌4小时，再高温高压灭菌的。操作过程戴口罩，一次性手套也经常换。样品是2015年6月份取得，一直在-80℃冰箱。 提取方法如下： 1. 组织匀浆处理 2. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。 3. 2-8℃10000×g离心15分钟。 4. 转移上清液到新的管子中，我取了500ul 5.加入500ul异丙醇，室温放置10分钟。 8. 2-8℃10000×g离心10分钟，移去上清。 9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟，弃上清。 10.剩余样品短暂离心后用枪头吸出多余的液体50-100μl无RNase的水，用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟。 所提取的RNA跑琼脂糖凝胶电泳，2%的，结果感觉不是很好。10月15好提取的样品上面两条带还是比较亮，后来的感觉降解了很多。 就想问下，像这样质量的RNA做反转录可以用么？我只打算反转录再做荧光定量的。 操作过程也希望各个大神们可以指点一二，谢谢。 有八个样品的是15号提取的，六个样品的是20号提取的。谢谢各位了  10-15下午2.jpg  10.20下午第一次2.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有224人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 各位虫友，如果你遇到这种情况，你会怎么做
已经有2人回复
- 刚同取得联系的读博目标导师打通电话，老师这样回复，还请虫友帮忙解读下
已经有16人回复
- 亲身经验整理，在校研究生签美国B1/B2的一些tips，各位虫友看过来
已经有11人回复
- 现在面临人生选择，不知道该怎么办，请各位虫友支个招，感谢万分！
已经有6人回复
- 想请教各位大牛，博士能靠自己熬出来吗
已经有26人回复
- 我是否该坚持还是离开，虫友们帮我选择下？
已经有12人回复
- 准确定位，积极面对，注意细节。
已经有40人回复
送红花一朵 
7楼2015-10-23 08:42:51
2楼2015-10-22 21:10:14
shucanwei
木虫 (正式写手)
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 4809.2
- 散金: 70
- 红花: 3
- 帖子: 464
- 在线: 72.7小时
- 虫号: 994653
- 注册: 2010-04-12
- 性别: GG
- 专业: 天体力学和人造卫星动力学
3楼2015-10-22 23:16:53
shucanwei
木虫 (正式写手)
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 4809.2
- 散金: 70
- 红花: 3
- 帖子: 464
- 在线: 72.7小时
- 虫号: 994653
- 注册: 2010-04-12
- 性别: GG
- 专业: 天体力学和人造卫星动力学
4楼2015-10-22 23:19:13
5楼2015-10-23 06:45:14
6楼2015-10-23 08:41:24
8楼2015-10-23 08:43:34
 本帖仅楼主可见 |
9楼2015-10-23 10:42:32
10楼2015-10-25 15:39:49