| 查看: 1142 | 回复: 10 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者狗狗狗尾巴草将赠送您 60 个金币 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
想问下各位虫友，这样的RNA能用么已有1人参与
|
||
|
小女子刚开始提取RAN，材料来源于鱼体肝脏、脾脏和肠黏膜。我是取样后直接将组织放在TRIZOL中的。 所用匀浆器是180℃烘烤8个小时，枪头是买的现成RNase free，所用水（75%酒精和电解液）都是1-2%DEPC水搅拌4小时，再高温高压灭菌的。操作过程戴口罩，一次性手套也经常换。样品是2015年6月份取得，一直在-80℃冰箱。 提取方法如下： 1. 组织匀浆处理 2. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。 3. 2-8℃10000×g离心15分钟。 4. 转移上清液到新的管子中，我取了500ul 5.加入500ul异丙醇，室温放置10分钟。 8. 2-8℃10000×g离心10分钟，移去上清。 9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟，弃上清。 10.剩余样品短暂离心后用枪头吸出多余的液体50-100μl无RNase的水，用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟。 所提取的RNA跑琼脂糖凝胶电泳，2%的，结果感觉不是很好。10月15好提取的样品上面两条带还是比较亮，后来的感觉降解了很多。 就想问下，像这样质量的RNA做反转录可以用么？我只打算反转录再做荧光定量的。 操作过程也希望各个大神们可以指点一二，谢谢。 有八个样品的是15号提取的，六个样品的是20号提取的。谢谢各位了  10-15下午2.jpg  10.20下午第一次2.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
二苄基磷酰氯，磷酸接酚羟基，
已经有11人回复
-
二苄基磷酰氯，磷酰氯
已经有10人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有129人回复
-
酸酐或者羧酸酰氯化
已经有15人回复
-
酚羟基接入磷酸，磷酸酯化
已经有26人回复
-
土壤中可溶性有机碳种类
已经有1人回复
-
韩国海关检测食用植物油中的苯并芘用的是哪种方法？
已经有0人回复
-
现有pP43NMK质粒，想换了pHT43，或者其他芽孢杆菌过表达质粒
已经有5人回复
-
请教脂质体包裹miRNA
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 为虫友分享本人求医经历，很有用，以备不时之需，谢谢阅读
已经有18人回复
- 各位虫友，如果你遇到这种情况，你会怎么做
已经有2人回复
- 刚同取得联系的读博目标导师打通电话，老师这样回复，还请虫友帮忙解读下
已经有16人回复
- 亲身经验整理，在校研究生签美国B1/B2的一些tips，各位虫友看过来
已经有11人回复
- 现在面临人生选择，不知道该怎么办，请各位虫友支个招，感谢万分！
已经有6人回复
- 我该何去何从，各位虫友给点意见
已经有31人回复
- 刚刚收到邀请信，求各位前辈鉴定下
已经有6人回复
- 想请教各位大牛，博士能靠自己熬出来吗
已经有26人回复
- 各位虫友，帮帮我分析下该怎么和我女朋友交往吧！！！
已经有109人回复
- 虫友签名集，有你的吗？
已经有1人回复
- 我是否该坚持还是离开，虫友们帮我选择下？
已经有12人回复
- 【原创非首发】仙人指路（长篇连载神话小说,欢迎各位虫友赐教）
已经有22人回复
- 准确定位，积极面对，注意细节。
已经有40人回复
8楼2015-10-23 08:43:34
2楼2015-10-22 21:10:14
shucanwei
木虫 (正式写手)
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 4809.2
- 散金: 70
- 红花: 3
- 帖子: 464
- 在线: 72.7小时
- 虫号: 994653
- 注册: 2010-04-12
- 性别: GG
- 专业: 天体力学和人造卫星动力学
3楼2015-10-22 23:16:53
shucanwei
木虫 (正式写手)
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 4809.2
- 散金: 70
- 红花: 3
- 帖子: 464
- 在线: 72.7小时
- 虫号: 994653
- 注册: 2010-04-12
- 性别: GG
- 专业: 天体力学和人造卫星动力学
4楼2015-10-22 23:19:13
5