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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 碳水化合物 » 求助多糖醇沉问题，谢谢各位大侠！
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倾雨晨

木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by w911227 at 2015-10-23 17:37:25
测一下絮状物的多糖和蛋白含量不就好了，一般浓缩的过程中产生沉淀是不是你浓缩温度太高导致的蛋白变性啊，醇沉的过程中会沉淀蛋白和糖，比如40%的乙醇沉淀出来的大多是蛋白，75%左右多糖会沉淀出来，如果絮状物不溶 ...

您好，无意中看见您的回复，上面所讲的75的乙醇是直接加入乙醇的浓度呢还是加入乙醇之后又算上多糖溶液重新计算的浓度呢？重新计算的话是换算之后的70的乙醇浓度，在加入的时候是不是用的是浓度为95的乙醇？谢谢

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11楼2016-11-12 09:40:47
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w911227

木虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 倾雨晨 at 2016-11-12 09:40:47
您好，无意中看见您的回复，上面所讲的75的乙醇是直接加入乙醇的浓度呢还是加入乙醇之后又算上多糖溶液重新计算的浓度呢？重新计算的话是换算之后的70的乙醇浓度，在加入的时候是不是用的是浓度为95的乙醇？谢谢
...

算的是加入乙醇之后又算上多糖溶液重新计算的浓度，加入的时候用95%或者无水乙醇都没有问题。
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苦难的日子终将逝去，但强者却永存
12楼2016-11-12 10:59:57
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倾雨晨

木虫 (著名写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by w911227 at 2016-11-12 10:59:57
算的是加入乙醇之后又算上多糖溶液重新计算的浓度，加入的时候用95%或者无水乙醇都没有问题。...

用无水乙醇的话，浓度最高也只有75而已呢

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13楼2016-11-12 12:38:21
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chenhaohaoz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

多糖的醇沉应该用75%左右的酒精，后学色素和蛋白质的去除，可以用丙酮和50%左右的乙醇。后续的多糖纯化可以过大孔树脂，依据不同的分子量进行分离。当然做活性如果要求更高的话，还可能用到制备液相和核磁。
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14楼2016-11-16 16:39:57
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z周先生

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

楼主，你应该先除蛋白，然后再醇沉，因为我的研究方向也是多糖这的，一半多糖都是水溶性的，你这个不是水溶性的，应该是蛋白变性的沉淀物。  在纯化的过程中 先加一步除蛋白，然后再醇沉浓缩，不知道楼主浓缩是不是用的旋转蒸发，现在可以考虑一下超滤离心。前提得知道你这个多糖的分子量大小，因为超滤离心可以避免温度的升高 是多糖降解。
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优秀不够，要无法代替
15楼2016-11-29 10:48:05
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悦悦28

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 大脸喵喵喵 at 2015-10-21 10:00:14
醇沉的沉淀才是多糖吧 多糖一般不溶于高浓度醇

想问一下，得到的浓缩液可以直接加进无水乙醇直到想要的浓度吗

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16楼2017-04-19 08:55:13
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ckyak

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by w911227 at 2015-10-23 17:37:25
测一下絮状物的多糖和蛋白含量不就好了，一般浓缩的过程中产生沉淀是不是你浓缩温度太高导致的蛋白变性啊，醇沉的过程中会沉淀蛋白和糖，比如40%的乙醇沉淀出来的大多是蛋白，75%左右多糖会沉淀出来，如果絮状物不溶 ...

您好，打扰您了，我在做多糖提取，遇到一些问题，想请教一下您
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17楼2018-12-03 18:22:56
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林小6子

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
15楼: Originally posted by z周先生 at 2016-11-29 10:48:05
楼主，你应该先除蛋白，然后再醇沉，因为我的研究方向也是多糖这的，一半多糖都是水溶性的，你这个不是水溶性的，应该是蛋白变性的沉淀物。  在纯化的过程中 先加一步除蛋白，然后再醇沉浓缩，不知道楼主浓缩是不是 ...

你好，我想请问一下您？我今天用旋转蒸发仪浓缩多糖后然后进行醇沉。我一加入乙醇就出现了各种絮状物，请问您有遇到过这种情况吗？是不是我加乙醇的时候加得太猛了？一下子就倒进去了~哈有就是我看到好多文献他们都没有除蛋白这一步骤，我是不是要加多这一步啊？是用sevag法吗？我后续要用多糖做动物实验，是个sevag法会对这个产生不好的影响吗？
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18楼2019-07-19 16:41:31
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琴小糖

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们最近也在做多糖，也出现了同样的情况，醇沉后的沉淀是黄棕色的，重新水溶后离心下来不溶的沉淀是白色的，上清是黄色的，这时候多糖应该就已经溶在水里了；剩下的不溶的沉淀虽然不溶于水，用考马斯亮蓝试着测了一下，主成分应该是蛋白，但是不确定会不会有糖蛋白。
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19楼2020-11-27 09:36:18
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