24小时热门版块排行榜    

查看: 1721  |  回复: 10

99蜗牛99

新虫 (小有名气)

[求助] PCR条带不正确,求大神赐教! 已有6人参与

晚辈验证过模板没问题,之前也曾p出来过正确的条带,但最近p出来的条带都变小了,体系及程序都一样,引物虽然新合成了,但序列应该和之前的一样,不知道什么原因,请大神赐教。。。。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

赵鑫易

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
99蜗牛99: 金币+2 2015-10-22 09:07:00
1.作对照阴性对照,不加模板。
2.换一管pcr酶,取引物储存液重新稀释。
3.换个人做
2楼2015-10-20 23:42:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

reddogs

金虫 (正式写手)

东海客

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
99蜗牛99: 金币+1 2015-10-22 09:07:30
这个简单,把P出来的带扣下来回收,送去测个序,看是啥东东
whereisawill,thereisaway
4楼2015-10-21 23:38:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

甲方不怕乙方

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
99蜗牛99: 金币+2 2015-10-22 19:08:25
有可能是你的胶板有问题,或者该换电泳液了,不出意外就这两个问题,楼主试一下,祝好运

发自小木虫Android客户端
我要让你的生活因为有我而更精彩
8楼2015-10-22 11:59:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

tolobio

新虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
nono2009: 金币-20, 屏蔽内容, 违规存档, 禁止回帖广告 2015-10-25 10:09:11
本帖内容被屏蔽

3楼2015-10-21 08:14:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

99蜗牛99

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by tolobio at 2015-10-21 08:14:22
保存了一段时间,模板可能有变。建议,重新制备模板。有条件的话,做个温度梯度PCR。
如果做克隆的话,可以送到我们公司,仅供参考:http://www.tolobio.com/service_detail.php?id=110

模板经酶切验证了,大小也合适,但稀释不同浓度的模板pcr出现了不同的非特异性条带。。。
5楼2015-10-22 09:11:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

99蜗牛99

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 赵鑫易 at 2015-10-20 23:42:17
1.作对照阴性对照,不加模板。
2.换一管pcr酶,取引物储存液重新稀释。
3.换个人做

引物浓度也会影响pcr特异性吗
6楼2015-10-22 09:12:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ray540213374

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
来些p出来正确跟不正确的图看看啊,实在不行就测序看看是那个序列
7楼2015-10-22 10:06:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zh10246

铁杆木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
测序验证下,是自己要的吗,不然重新设计引物
9楼2015-10-22 14:24:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

科学小覃

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
估计是退火温度不合适吧,试试提高温度看看。
生物科学
10楼2015-10-22 15:32:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 99蜗牛99 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] fileCode有新解读? +7 Tide man 2026-08-08 13/650 2026-08-08 09:47 by zhengxianzb
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 5/250 2026-08-08 08:59 by 6vVgjDL4CnGu
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:47 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +9 且听虎啸 2026-08-07 12/600 2026-08-07 21:53 by 理想三旬2025
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +3 布布和一二 2026-08-07 3/150 2026-08-07 15:09 by gltch
[论文投稿] 十年后又回来了,论文投稿求助 +4 哈哈114477 2026-08-01 4/200 2026-08-07 14:39 by jgy194592
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +4 yang182083 2026-08-06 6/300 2026-08-07 12:43 by 虫友是什么虫
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 8月时间戳变的,举个手。玩一下,释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息,有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 什么时候能放榜呀? +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
请填处理意见