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99蜗牛99

新虫 (小有名气)

[求助] PCR条带不正确,求大神赐教! 已有6人参与

晚辈验证过模板没问题,之前也曾p出来过正确的条带,但最近p出来的条带都变小了,体系及程序都一样,引物虽然新合成了,但序列应该和之前的一样,不知道什么原因,请大神赐教。。。。
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tolobio

新虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
nono2009: 金币-20, 屏蔽内容, 违规存档, 禁止回帖广告 2015-10-25 10:09:11
本帖内容被屏蔽

3楼2015-10-21 08:14:22
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查看全部 11 个回答

赵鑫易

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
99蜗牛99: 金币+2 2015-10-22 09:07:00
1.作对照阴性对照,不加模板。
2.换一管pcr酶,取引物储存液重新稀释。
3.换个人做
2楼2015-10-20 23:42:17
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reddogs

金虫 (正式写手)

东海客

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
99蜗牛99: 金币+1 2015-10-22 09:07:30
这个简单,把P出来的带扣下来回收,送去测个序,看是啥东东
whereisawill,thereisaway
4楼2015-10-21 23:38:57
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99蜗牛99

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by tolobio at 2015-10-21 08:14:22
保存了一段时间,模板可能有变。建议,重新制备模板。有条件的话,做个温度梯度PCR。
如果做克隆的话,可以送到我们公司,仅供参考:http://www.tolobio.com/service_detail.php?id=110

模板经酶切验证了,大小也合适,但稀释不同浓度的模板pcr出现了不同的非特异性条带。。。
5楼2015-10-22 09:11:48
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