应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » HEK293T 培养时底部有黑色小颗粒(不浮走，洗不掉) 转染后第2天
41/1返回列表
查看: 2171  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

DJunsheep

新虫 (初入文坛)

[求助] HEK293T 培养时底部有黑色小颗粒(不浮走，洗不掉) 转染后第2天 已有3人参与

我刚接触细胞培养不久，养过2个月大鼠小鼠的造骨细胞（比HEK脆弱得多），没试过污染的。

前不久开始做HEK293T，养的时候发现细胞的缝隙会有黑色小点，贴底不浮，PBS洗不掉。

HEK293T 培养时底部有黑色小颗粒(不浮走，洗不掉) 转染后第2天

HEK293T 培养时底部有黑色小颗粒(不浮走，洗不掉) 转染后第2天-1

HEK293T 培养时底部有黑色小颗粒(不浮走，洗不掉) 转染后第2天-2

如果只是传代的话好像没有影响，做转染也还好，但转染第2天或者种的时候就会死一大片（种不下去、形状改变、浮起等），有时候可以从新坐下去贴壁但不是星星状而是有点肥圆（贴底不浮），有时候从转染第二天开始颜色会改变。

浮起的样子：
HEK293T 培养时底部有黑色小颗粒(不浮走，洗不掉) 转染后第2天-3

试过培养基（DMEM）正常，其他正在试，看有没有染菌的。
但一般染菌的话细胞传代的时候应该有影响，所以想问问有没有哪位知道除了污染还有什么可能出现黑点以及引起细胞死亡的？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-10-19 19:10:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ahushun

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我也出现过这种情况，先怀疑是支原体感染，但是加了支原体抗生素后依然不见好转。后来怀疑是血清问题，换了好几种，最后是用Gibco的最贵的血清后就变好了，不知道你的血清来源哪里，你可以换一点试试看
赞一下 回复此楼
天行健，君子有自强不息；地势坤，君子以厚德载物；
2楼2015-10-20 07:52:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jora0418

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我的细胞也是这样，不做转染还好一做转染就不容易贴壁。确定不是支原体污染么？因为我最近在试支原体清除剂去去除这些小黑点。
赞一下 回复此楼
3楼2015-11-14 16:13:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

renshaofang

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我也试过这个情况，我养的是癌细胞，养着养着就成这样了，但是我觉得不是支原体污染导致的，我养好多种癌细胞，用的是同一个培养液，但是有这情况的只是其中一个细胞，所以我觉得与血清&培养液无关。我觉得应该是状态不好导致的。
赞一下 回复此楼
4楼2016-01-20 20:16:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 DJunsheep 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:19 by oEVWOejN9taj
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:27 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 5/250 2026-08-08 16:27 by oEVWOejN9taj
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:22 by oEVWOejN9taj
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:47 by oEVWOejN9taj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:42 by oEVWOejN9taj
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:39 by oEVWOejN9taj
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:27 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 4/200 2026-08-08 14:27 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭