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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » cho细胞表达的蛋白都是分泌型的吗？若基因上无信号肽是否需要加？
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杭杭子1102

新虫 (初入文坛)

[交流] cho细胞表达的蛋白都是分泌型的吗？若基因上无信号肽是否需要加？ 已有2人参与

我要表达硫解酶相关蛋白，现在已连到pcDNA3.1上，之前用hek293T表达，但发现其为G418耐药，所以想换cho细胞表达，再用g418筛选，但不知道cho细胞是不是都将蛋白分泌到培养液中，若是的话，后续蛋白纯化就会方便很多。所以cho细胞表达的蛋白都是分泌型的吗？若基因上无信号肽是否需要加？
ps：各位谁的实验室有cho细胞啊，我用hek293t交换，不胜感激
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1楼 2015-06-09 00:28:33
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小周

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
有信号肽才能外泌呀！没有就给他加上！
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2楼2015-06-09 08:33:35
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calorimetry

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不可能有任何细胞都只表达分泌性信号，你如果不清楚一个蛋白质是不是分泌性的，可以用生物信息学软件进行功能预测。
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3楼2015-06-09 08:54:11
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杭杭子1102

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小周 at 2015-06-09 08:33:35
有信号肽才能外泌呀！没有就给他加上！

我用singleip查了没有信号肽啊，加是怎么加啊?信号肽相关基因是什么？才进实验室不是很懂。还有我之后想研究酶活性，会有影响吗？
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4楼2015-06-09 10:29:02
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杭杭子1102

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by calorimetry at 2015-06-09 08:54:11
不可能有任何细胞都只表达分泌性信号，你如果不清楚一个蛋白质是不是分泌性的，可以用生物信息学软件进行功能预测。

预测了没有啊。要自己加吗？会影响其酶活性吗？
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5楼2015-06-09 10:37:40
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calorimetry

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
加上的信号肽与目的蛋白质之间一般可以有3-5个亲水的氨基酸残基构成，尽量减少对于目的蛋白质的折叠的影响，一般不会构成对于目的蛋白质的功能的影响。加上额外的信号肽之后也可以用生物信息学软件加以空间结构的预测和生物功能的预测。
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6楼2015-06-09 10:46:36
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杭杭子1102

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by calorimetry at 2015-06-09 10:46:36
加上的信号肽与目的蛋白质之间一般可以有3-5个亲水的氨基酸残基构成，尽量减少对于目的蛋白质的折叠的影响，一般不会构成对于目的蛋白质的功能的影响。加上额外的信号肽之后也可以用生物信息学软件加以空间结构的预 ...

能否说的再详细些？不是很懂啊？ 加上信号肽就与酶切链接的形式连上吗？加n端和c端有生物信息学软件怎么预测啊？
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7楼2015-06-09 11:02:32
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calorimetry

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
D.J.Rigden edits,From Protein Structure to Function with Bioinformatics(2009)   
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=6382178&fpage=1&target=blank
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8楼2015-06-09 11:23:37
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杭杭子1102

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by calorimetry at 2015-06-09 11:23:37
D.J.Rigden edits,From Protein Structure to Function with Bioinformatics(2009)   
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=6382178&fpage=1&target=blank

链接打不开啊？
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9楼2015-06-09 12:10:49
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calorimetry

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
直接点击http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=6382178&fpage=1&target=blank

或者点击http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=6382178

或者复制链接，都可以打开，我刚试的。。
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10楼2015-06-09 13:58:02
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