应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 基因组总DNA 电泳，这些尾带是降解的吗？
52/1返回列表
查看: 2592  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

runye2015

新虫 (小有名气)

[交流] 基因组总DNA 电泳，这些尾带是降解的吗？ 已有6人参与

如题
1、两三个月前提取的基因组总DNA ，一直在零下80度冰箱保存
2、左1为12500 的MARKER，左2-3两样本是为3个月前提取的，4-5两样本是为2个月前提取
3、0.8%的琼脂糖，90V 5分钟，然后170V 25分钟
4、麻烦大家看下，我的DNA 有没有降解，尾带很亮，如果后续做PCR-DGGE还有荧光定量PCR还有会不会有影响？
谢谢大家啦！

基因组总DNA 电泳，这些尾带是降解的吗？
基因组总DNA 琼脂糖凝胶电泳
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-10-17 14:09:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tolobio

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by runye2015 at 2015-10-18 12:33:41
嗯嗯～谢谢您的回复！图里的那一部分提示降解呢～是最下面的尾带吗？～～
...

不了解你的marker大小。下面很亮的地方，可能是染色体断掉了（降解了）或者是RNA污染。加点RNaseA，然后跑个电泳看看吧。不过应该都不影响你后面的实验。
赞一下 回复此楼
13楼2015-10-18 20:20:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

秉秉的法兰西

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
runye2015: 金币+1 2015-10-17 22:52:22
可能是引物特异性不高。或者引物时间长了

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
2楼2015-10-17 17:32:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王平阳

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
runye2015: 金币+5 2015-10-18 09:46:21
引用回帖:
2楼: Originally posted by 秉秉的法兰西 at 2015-10-17 17:32:48
可能是引物特异性不高。或者引物时间长了

人家是直接基因组DNA电泳，没有做PCR，哪来的引物啊，麻烦回答问题前把问题看清楚先？

言归正传，提取总DNA，不可避免会带入RNA的，所以有可能是RNA，不过也有可能是DNA降解所致，我的经验是提取的DNA只要没有重大失误还是可以用的，做PCR的时候稀释一下，稀释到10到100 ng/uL使用效果会比较好，祝你好运！
赞一下(2人) 回复此楼
没有做不到，只有想不到！
3楼2015-10-17 20:28:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jianguochen

新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
runye2015: 金币+4 2015-10-18 09:52:44
一般DNA降解弥散的话，跟你这个图不同，有可能跟楼上说的一样，有RNA污染，而且还降解了，光看你的胶图的话，看得出纯度是有问题的，胶孔里有亮带，应该是有蛋白残留，你是用什么方法提取的呢，有用分光光度计测下么，可以用RNase消化，然后纯化下。免得Qpcr时RNA引入非特异产物。
赞一下 回复此楼
4楼2015-10-17 21:40:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学/290求调剂/本科经历丰富/工科也可 +7 丹青奶盖 2026-03-26 7/350 2026-03-26 19:18 by macy2011
[考研] 321求调剂 +5 wasdssaa 2026-03-26 5/250 2026-03-26 18:00 by fmesaito
[考研] 297求调剂 +6 田洪有 2026-03-26 6/300 2026-03-26 15:55 by 不吃魚的貓
[考研] 263求调剂 +6 yqdszhdap－ 2026-03-22 10/500 2026-03-26 13:11 by 公瑾逍遥
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +5 曼111 2026-03-24 6/300 2026-03-26 13:04 by 13756423260
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +9 Mr. Z 2026-03-25 9/450 2026-03-26 10:36 by baoball
[考研] 求调剂 +3 QiMing7 2026-03-25 3/150 2026-03-25 21:13 by 给你你注意休息
[考研] 材料学硕333求调剂 +4 北道巷 2026-03-24 4/200 2026-03-25 14:16 by mapenggao
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 282求调剂 +3 wcq131415 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:16 by userper
[考研] 085600材料与化工调剂 +9 A-哆啦Z梦 2026-03-23 15/750 2026-03-25 11:18 by Ainin_
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 350求调剂 +6 weudhdk 2026-03-19 6/300 2026-03-23 15:47 by tangyuan0840221
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
[考研] 261求B区调剂，科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭