应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助，关于100kDa蛋白诱导表达条件
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1899  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

784269560

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助，关于100kDa蛋白诱导表达条件 已有2人参与

大家好。我在做100KDa蛋白表达条件，载体为pet32a，表达菌株为Rossta,尝试了1mM和0.5mMIPTG浓度，转速为160，在30度与37度分别诱导５ｈ，但是一点目的蛋白都看不到。请问有谁做过类似的蛋白，能给些经验节省时间。求大家帮帮忙。时间紧啊没办法换载体了。谢谢了
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-10-16 11:40:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

784269560

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 粒粒分明 at 2015-10-19 14:37:35
换一下表达菌株呢？我通常都是Pet系列载体用BL21菌株

两者差别应该不大吧，好像rossta比BL21好一些吧，可以翻译稀有密码子
赞一下 回复此楼
9楼2015-10-22 16:08:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

tolobio

新虫 (小有名气)
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 应助指数-1, 请勿刷应助指数，已经看到您很多次无用的应助了。谢谢你的理解与配合。 2015-10-17 18:03:06
蛋白各不相同。即使别人做过，也很难给你什么有用的建议。基本的摸索大家都差不多：比如换宿主，换tag，换诱导条件等等。比较麻烦。建议还是找公司来做比较省事：http://www.tolobio.com/service_detail.php?id=154
赞一下 回复此楼
2楼2015-10-16 15:35:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MarchZR

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-10-17 18:02:08
你这是原核真核表达，哦rossta是原核表达哈，100kb也不小了，你这没表达，是上清没有表达还是沉淀没有表达，如果是上清，估计你的目的条带在沉淀里吧，形成包涵体了，说点明白些吧
赞一下 回复此楼
3楼2015-10-16 15:50:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

784269560

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by MarchZR at 2015-10-16 15:50:04
你这是原核真核表达，哦rossta是原核表达哈，100kb也不小了，你这没表达，是上清没有表达还是沉淀没有表达，如果是上清，估计你的目的条带在沉淀里吧，形成包涵体了，说点明白些吧...

我只是初步诱导，就是直接拿菌液加上样缓冲液混匀煮沸离心取上清加的样，但是一点目的带都没有。完全没有表达
赞一下 回复此楼
4楼2015-10-17 10:01:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 315求调剂 +8 欣喜777 2026-04-04 9/450 2026-04-04 22:45 by 理想在实践之中
[考研] 304求调剂（085602，过四级，一志愿985） +6 化工人999 2026-04-04 6/300 2026-04-04 22:37 by 啊李999
[考研] 292分，材料与化工，申请调剂 +22 程晴之 2026-04-01 26/1300 2026-04-04 22:03 by hemengdong
[考研] 085400电子信息319求调剂（接受跨专业调剂） +5 星星不眨眼喽 2026-04-03 6/300 2026-04-04 21:50 by hemengdong
[考研] 324求调剂 +14 想上学求调 2026-04-02 15/750 2026-04-04 20:31 by 无际的草原
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-03-31 5/250 2026-04-04 19:45 by 1753564080
[考研] 285求调剂 +4 AZMK 2026-04-04 5/250 2026-04-04 16:45 by cql1109
[考研] 求调剂，一志愿北京中医药大学 +3 小小达不溜 2026-04-02 3/150 2026-04-03 22:55 by 冲矢昴星团
[考研] 11408，284分，二战真诚求调剂 +4 12.27 2026-04-02 4/200 2026-04-03 14:14 by dxiaoxin
[考研] 285求调剂 +6 FZAC123 2026-03-30 6/300 2026-04-03 12:22 by xingguangj
[考研] 286求调剂 +7 Faune 2026-03-30 7/350 2026-04-03 10:14 by linyelide
[考研] 求调剂！生物与医药专硕 +4 逆转陆先生 2026-04-01 5/250 2026-04-03 08:33 by Jaylen.
[考研] 一志愿北京科技材料科学与工程288分，求调剂 +14 是辰啊 2026-04-02 14/700 2026-04-02 21:10 by dongzh2009
[考研] 找调剂 +6 楚乔乔 2026-04-01 6/300 2026-04-02 12:06 by xiaoranmu
[考研] 279求调剂 +7 莫xiao 2026-04-01 7/350 2026-04-01 22:05 by 客尔美德
[考研] 349求调剂 +6 吃的不少 2026-04-01 6/300 2026-04-01 17:55 by JYD2011
[考研] 285求调剂 +7 AZMK 2026-03-30 13/650 2026-04-01 17:00 by 七度不信任
[考研] 340求调剂 +4 希望如此i 2026-03-31 4/200 2026-03-31 16:40 by 690616278
[考研] 0856 335分 +9 cccchenso 2026-03-29 9/450 2026-03-31 16:37 by lishahe
[考研] 材料工程专硕求调剂 +10 hyl3153942 2026-03-29 10/500 2026-03-31 16:31 by hypershenger
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭