应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助，关于100kDa蛋白诱导表达条件
51/1返回列表
查看: 2005  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

784269560

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助，关于100kDa蛋白诱导表达条件 已有2人参与

大家好。我在做100KDa蛋白表达条件，载体为pet32a，表达菌株为Rossta,尝试了1mM和0.5mMIPTG浓度，转速为160，在30度与37度分别诱导５ｈ，但是一点目的蛋白都看不到。请问有谁做过类似的蛋白，能给些经验节省时间。求大家帮帮忙。时间紧啊没办法换载体了。谢谢了
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-10-16 11:40:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MarchZR

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-10-17 18:02:08
你这是原核真核表达，哦rossta是原核表达哈，100kb也不小了，你这没表达，是上清没有表达还是沉淀没有表达，如果是上清，估计你的目的条带在沉淀里吧，形成包涵体了，说点明白些吧
赞一下 回复此楼
3楼2015-10-16 15:50:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

tolobio

新虫 (小有名气)
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 应助指数-1, 请勿刷应助指数，已经看到您很多次无用的应助了。谢谢你的理解与配合。 2015-10-17 18:03:06
蛋白各不相同。即使别人做过，也很难给你什么有用的建议。基本的摸索大家都差不多：比如换宿主，换tag，换诱导条件等等。比较麻烦。建议还是找公司来做比较省事：http://www.tolobio.com/service_detail.php?id=154
赞一下 回复此楼
2楼2015-10-16 15:35:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

784269560

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by MarchZR at 2015-10-16 15:50:04
你这是原核真核表达，哦rossta是原核表达哈，100kb也不小了，你这没表达，是上清没有表达还是沉淀没有表达，如果是上清，估计你的目的条带在沉淀里吧，形成包涵体了，说点明白些吧...

我只是初步诱导，就是直接拿菌液加上样缓冲液混匀煮沸离心取上清加的样，但是一点目的带都没有。完全没有表达
赞一下 回复此楼
4楼2015-10-17 10:01:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MarchZR

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 784269560 at 2015-10-17 10:01:17
我只是初步诱导，就是直接拿菌液加上样缓冲液混匀煮沸离心取上清加的样，但是一点目的带都没有。完全没有表达...

啥都不说 上序列
回复此楼
5楼2015-10-19 11:05:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +15 爱看书的可乐 2026-08-26 17/850 2026-08-27 11:29 by xxniao123
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +5 苏东坡二世 2026-08-23 5/250 2026-08-27 10:39 by 炜雨
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 +7 晴天加油 2026-08-26 8/400 2026-08-27 07:53 by longfie172
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 04:33 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 系统查不到 +10 董八千 2026-08-26 10/500 2026-08-26 16:30 by Equinoxhua
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 科研孤儿太难了 +21 我4大白菜 2026-08-20 22/1100 2026-08-26 11:29 by nlgza
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭