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[交流]
请大家看一下这张电泳图
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新手求教！ 1、用16SrDNA通用引物，细菌基因组总DNA为模板， 2、普通PCR 50微升体系、模板2微升，引物上下游各1微升， 退火温度56°C（看到文献，没有做温度梯度） 3、电压 110V 时间40分钟 2、引物序列： 16SrDNA 338F:CGCCCGCCGCGCGCGGCGGGCGGGGCGGGGGCACGGGGGG CCTACGGGAGGCAGCAG 518R:ATTACCGCGGCTGCTCC 3、左一MARKER跑的很清楚 500-25BP 依次是 500 400 300 200 150 100 75 50 25 4、条带最上方有可能是加样的时候飘出来造成的，做出来没有看到目的条带，求大神讲解！  电泳图.jpg |
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-10-16 20:27:59
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-10-16 20:27:59
| 建议重新设计一条短些的引物，重新做个PCR，看看能否扩增出来，两个目的：1，看看是否是基因组DNA的问题；2，如果能够扩增出来的话，可以再以扩增产物为模板，用你的这对引物扩增。可能会容易些。可以联系我们www.tolobio.com；或者support@tolobio.com |
7楼2015-10-16 17:00:28
肥猫p
木虫 (正式写手)
- 应助: 94 (初中生)
- 金币: 2763.1
- 散金: 145
- 红花: 10
- 帖子: 340
- 在线: 189.3小时
- 虫号: 1709733
- 注册: 2012-03-22
- 专业: 微生物资源与分类学
2楼2015-10-15 21:38:10
3楼2015-10-15 22:59:51
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
runye2015: 金币+3 2015-10-16 13:58:33
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
runye2015: 金币+3 2015-10-16 13:58:33
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是不是总DNA有问题？总DNA有跑过电泳吗？条带清晰吗？什么时候提取的？是—80保存吗？ 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2015-10-15 23:10:21