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[交流]
请大家看一下这张电泳图
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新手求教！ 1、用16SrDNA通用引物，细菌基因组总DNA为模板， 2、普通PCR 50微升体系、模板2微升，引物上下游各1微升， 退火温度56°C（看到文献，没有做温度梯度） 3、电压 110V 时间40分钟 2、引物序列： 16SrDNA 338F:CGCCCGCCGCGCGCGGCGGGCGGGGCGGGGGCACGGGGGG CCTACGGGAGGCAGCAG 518R:ATTACCGCGGCTGCTCC 3、左一MARKER跑的很清楚 500-25BP 依次是 500 400 300 200 150 100 75 50 25 4、条带最上方有可能是加样的时候飘出来造成的，做出来没有看到目的条带，求大神讲解！  电泳图.jpg |
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肥猫p
木虫 (正式写手)
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2楼2015-10-15 21:38:10
3楼2015-10-15 22:59:51
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
runye2015: 金币+3 2015-10-16 13:58:33
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runye2015: 金币+3 2015-10-16 13:58:33
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是不是总DNA有问题？总DNA有跑过电泳吗？条带清晰吗？什么时候提取的？是—80保存吗？ 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2015-10-15 23:10:21
5楼2015-10-16 14:02:36
6楼2015-10-16 16:53:09
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-10-16 20:27:59
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-10-16 20:27:59
| 建议重新设计一条短些的引物，重新做个PCR，看看能否扩增出来，两个目的：1，看看是否是基因组DNA的问题；2，如果能够扩增出来的话，可以再以扩增产物为模板，用你的这对引物扩增。可能会容易些。可以联系我们www.tolobio.com；或者support@tolobio.com |
7楼2015-10-16 17:00:28
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
runye2015: 金币+5 2015-10-16 20:44:13
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runye2015: 金币+5 2015-10-16 20:44:13
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你可以将总dna跑下电泳，确保模版没有问题，然后检查引物的情况 发自小木虫IOS客户端 |
8楼2015-10-16 20:42:41
9楼2015-10-16 20:44:27