24小时热门版块排行榜    

查看: 1835  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

高傲的范儿

金虫 (小有名气)


[求助] 如何选择蛋白表达宿主菌 已有2人参与

本人要做的课题是LSD1蛋白表达、纯化条件的优化,实验室现在所用的表达载体是pET28b,所用菌株是BL21(DE3)。我首先要优化的条件是蛋白表达宿主菌,看BL21(DE3)是否为最合适菌株,对于纷繁复杂的宿主菌,我看的是眼花缭乱,不知道如何选择。有些帖子说要根据表达蛋白去选择菌株,不知道主要看蛋白的什么性质,哪些特征去做选择。特求助于万能的虫友,谢谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

高傲的范儿

金虫 (小有名气)


引用回帖:
7楼: Originally posted by tolobio at 2015-10-19 06:42:46
建议送到公司来做,仅供参考:http://www.tolobio.com/service_detail.php?id=154

谢谢您,我会考虑的

发自小木虫Android客户端
8楼2015-10-19 07:05:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

victorLeo

木虫 (小有名气)

General Frontier

大多是BL21,但是目的基因的序列要生物信息预测下有无分泌信号肽,当然这还是得依靠实际的表达情况来看,如果要是上清表达那么可溶性的蛋白较易纯化,如果要是沉淀表达的话,就是包涵体了,纯化较难。如果BL21不行一般还有用rosseta菌株的。
希望探讨,多谢指教,讨厌说教,更讨厌不懂装懂。
2楼2015-10-16 16:51:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

高傲的范儿

金虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by victorLeo at 2015-10-16 16:51:29
大多是BL21,但是目的基因的序列要生物信息预测下有无分泌信号肽,当然这还是得依靠实际的表达情况来看,如果要是上清表达那么可溶性的蛋白较易纯化,如果要是沉淀表达的话,就是包涵体了,纯化较难。如果BL21不行一 ...

谢谢您的答复,我还有两个问题。信号肽的预测是用软件还是别的什么工具?蛋白在菌体内,需要超声裂解,这个属于包涵体吗?

发自小木虫Android客户端
3楼2015-10-17 08:02:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

穿白大褂约会

禁言 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
高傲的范儿: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-10-24 16:44:59
本帖内容被屏蔽

4楼2015-10-19 00:06:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 07:41 by OEbVnUOu01ol
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 5/250 2026-08-23 04:07 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:55 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 03:52 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:43 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 03:40 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 让我中一个面上吧! +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见