24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1557  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

高傲的范儿

兑换贵宾

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!


[求助] 如何选择蛋白表达宿主菌 已有2人参与

本人要做的课题是LSD1蛋白表达、纯化条件的优化,实验室现在所用的表达载体是pET28b,所用菌株是BL21(DE3)。我首先要优化的条件是蛋白表达宿主菌,看BL21(DE3)是否为最合适菌株,对于纷繁复杂的宿主菌,我看的是眼花缭乱,不知道如何选择。有些帖子说要根据表达蛋白去选择菌株,不知道主要看蛋白的什么性质,哪些特征去做选择。特求助于万能的虫友,谢谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

厚德求是

主管区长

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

你把手头有的E.coli宿主都试试,做实验不能闲下来,一边做一遍看文献,慢慢就有了思路。

发自小木虫IOS客户端
6楼2015-10-19 00:45:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

victorLeo

主管区长

General Frontier

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

大多是BL21,但是目的基因的序列要生物信息预测下有无分泌信号肽,当然这还是得依靠实际的表达情况来看,如果要是上清表达那么可溶性的蛋白较易纯化,如果要是沉淀表达的话,就是包涵体了,纯化较难。如果BL21不行一般还有用rosseta菌株的。
希望探讨,多谢指教,讨厌说教,更讨厌不懂装懂。
2楼2015-10-16 16:51:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

高傲的范儿

版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!


引用回帖:
2楼: Originally posted by victorLeo at 2015-10-16 16:51:29
大多是BL21,但是目的基因的序列要生物信息预测下有无分泌信号肽,当然这还是得依靠实际的表达情况来看,如果要是上清表达那么可溶性的蛋白较易纯化,如果要是沉淀表达的话,就是包涵体了,纯化较难。如果BL21不行一 ...

谢谢您的答复,我还有两个问题。信号肽的预测是用软件还是别的什么工具?蛋白在菌体内,需要超声裂解,这个属于包涵体吗?

发自小木虫Android客户端
3楼2015-10-17 08:02:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

穿白大褂约会

专家顾问

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
高傲的范儿: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-10-24 16:44:59
本帖内容被屏蔽

4楼2015-10-19 00:06:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料调剂 +6 一样YWY 2026-03-31 6/300 2026-04-01 01:28 by 1018329917
[考研] 材料专硕306英一数二 +3 z1z2z3879 2026-03-31 3/150 2026-04-01 00:39 by fmesaito
[考研] 求调剂推荐 材料 304 +18 荷包蛋hyj 2026-03-26 18/900 2026-03-31 18:08 by 544594351
[考研] 一志愿华东师范大学有机化学专业,初试351分,复试被刷求调剂! +9 真名有冰 2026-03-29 10/500 2026-03-31 18:01 by xhai2011
[考研] 0710生物学求调剂! +5 叙述文 2026-03-31 5/250 2026-03-31 17:32 by 唐沐儿
[考研] 086000生物与医药 初试274求调剂 +4 小叮当来了 2026-03-30 4/200 2026-03-31 16:48 by shengliu165
[考研] 考研调剂求助 +7 13287130938 2026-03-31 7/350 2026-03-31 16:39 by 690616278
[考研] 085404 22408 315分 +5 zhuangyan123 2026-03-31 6/300 2026-03-31 13:48 by limeifeng
[考研] 293分求调剂,外语为俄语 +5 加一一九 2026-03-31 5/250 2026-03-31 09:39 by zhshch
[考研] 085601一志愿西北工业大学初试346 +4 085601初试346 2026-03-30 4/200 2026-03-31 07:47 by jp9609
[考研] 085701求调剂初试286分 +5 secret0328 2026-03-28 5/250 2026-03-30 12:54 by fangnagu
[考研] 0703本科郑州大学求调剂 +7 nhj_ 2026-03-25 7/350 2026-03-30 12:44 by fangnagu
[考研] 283求调剂(080500) +14 A child 2026-03-27 14/700 2026-03-30 12:06 by 探123
[考研] 环境科学与工程334分求调剂 +6 王一一依依 2026-03-30 8/400 2026-03-30 11:52 by yjolah
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +4 邱gl 2026-03-26 7/350 2026-03-30 08:39 by 探123
[考研] 283求调剂 +3 A child 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:41 by ms629
[考研] 265求调剂 +8 小木虫085600 2026-03-27 8/400 2026-03-27 22:16 by 无际的草原
[考研] 调剂 +3 李嘉图·S·路 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:19 by wangjy2002
[考研] 303求调剂 +6 蓝山月 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:47 by 418490947
[考研] 材料专硕 335 分求调剂 +4 拒绝冷暴力 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:45 by haxia
信息提示
请填处理意见