24小时热门版块排行榜    

查看: 2302  |  回复: 27
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

薇筱123

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助!!!双酶切连接不上这是为什么 已有7人参与

实验想要让一个7000左右bp的质粒载体变小一点,所以用Kpn1和Not1双酶切,切下一个400bp左右的片段,跑胶,但是看不到400bp的条带,然后In-fusion连上一个20bp左右的片段,然后转化,涂板子,都不长菌,这是说明我的双酶切没成功还是没有连上那个20bp的片段,我要怎样改进实验呢?求指导!都重复实验好几次了,都成功不了啊!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hugeneuron

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
双酶切不成功就做两个单酶切看看是哪个酶切没成功。

发自小木虫IOS客户端
28楼2015-10-16 11:13:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 28 个回答

kangaroo0513

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,分子生物期待您更多精彩。 2015-10-15 18:11:32
你这描述的就是不想让别人能帮得上忙的样子。。。。
2楼2015-10-15 01:31:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

thetc

木虫 (小有名气)


myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流。 2015-10-15 18:11:39
查一下你那2个酶的最适条件,把你实验的条件调整调整把。

发自小木虫IOS客户端
加入,希望能学习多一点
3楼2015-10-15 07:35:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

厚德求是

金虫 (著名写手)

Ph. D. Prof.

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,分子生物期待您更多精彩。 2015-10-15 18:11:54
转化不成功的原因可能有非常多,连接酶的效率,反应的条件,感受态的效率,抗性的选择。建议设立对照组,逐一排查上述问题。

发自小木虫IOS客户端
4楼2015-10-15 07:42:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 7/350 2026-09-01 15:18 by myrtle
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 8/400 2026-09-01 12:58 by ssyjh
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
请填处理意见