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maoxuequn

新虫 (小有名气)

[求助] PCR跑胶图 已有3人参与

最近我的胶总是变成这样,各位,我也不知道怎么破,因为都是一样的加样和程序,但是,最近一直出现这个,不晓得什么原因。胶啊,还有各种都没有改变。

PCR跑胶图
IMG_7434.JPG
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maoxuequn

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 董小露 at 2015-10-14 17:45:35
楼主你解决这个问题了么,我做的也是这样的

提高退火温度,还是进行中,并没有太大的改善
12楼2015-10-18 20:45:04
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反应链

新虫 (正式写手)

当我遇到这种情况的时候,首先把模板和引物换了,用质粒和相应的引物扩增。因为质粒是最容易扩增的,可以快速确定PCR仪、扩增体系、电泳条件等有没有问题。一般都没有问题的,确定后再使用新稀释的DNA和引物,原来是降解了。
2楼2015-10-13 19:46:27
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maoxuequn

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 反应链 at 2015-10-13 19:46:27
当我遇到这种情况的时候,首先把模板和引物换了,用质粒和相应的引物扩增。因为质粒是最容易扩增的,可以快速确定PCR仪、扩增体系、电泳条件等有没有问题。一般都没有问题的,确定后再使用新稀释的DNA和引物,原来是 ...

这是植物提取的DNA,降解的可能真的比较大,差不多也有近2年的时间了。就是也算是突然出现吧,因为之前一次的几次都没有这种情况出现,
3楼2015-10-13 20:55:42
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kodey

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
maoxuequn: 金币+15, ★★★很有帮助 2015-10-18 20:43:55
模板少加些,提高一下PCR退火温度试试。
4楼2015-10-14 10:18:36
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